Tóm tắt Luận văn Nghiên cứu phân lập và xác định cấu trúc một số hợp chất hóa học trong một số dung môi của thân cây cau chuột núi (Pinanga duperreana) thuộc họ cau (Arecaceae)ởtỉnh Hòa Bình của Việt Nam

Công trình ñưꢃc hoàn thành ti  
ĐꢀI HC ĐÀ NNG  
Ngưꢔi hưꢕng dn khoa hc: GS.TSKH. TRN VĂN SUNG  
Phn bin 1: PGS.TS. Lê THi  
Phn bin 2: PGS.TS. Võ Vin  
Lun văn ñã ñưꢃc bo vtrưꢈc hi ñꢊng chm Lun văn  
tt nghip Thc sĩ Khoa hc hp ti Đꢄi hc Đà Nng vào  
ngày 13 tháng 11 năm 2012.  
Có thtìm hiu lun văn ti:  
-
-
Trung tâm Thông tin – Hc liu, Đꢄi hc Đà Nng  
Thư vin trưꢐng Đꢄi hc Sư phm, Đꢄi hc Đà Nng  
3
4
Mꢍ ĐꢘU  
cây còn chưa ñưꢃc nghiên cu. Còn các công trình nghiên cu ca nưꢈc  
ngoài thì ñưꢃc công bchưa nhiu.  
1. Tính cp thit ca ñꢠ tài  
Txưa ñꢒn nay, con ngưꢐi ñã bit khai thác ngun tài nguyên sinh  
hc quý giá này ñꢏ làm thc phm, thuc cha bnh, các vt liu cũng  
như nhiên liu cho cuc sng thưꢐng ngày. Cùng vi sphát trin ca  
khoa hc kthut, vic khai thác và sdng nhng cây thuc quý  
không còn ñơn thun chda vào kinh nghim mà còn có nhng cơ sꢜ  
khoa hc. Mt trong nhng con ñưꢐng hu hiu ñꢏ phát hin ra các cht  
có hot tính tim năng, có thphát trin thành thuc cha bnh cho con  
ngưꢐi, gia súc và cây trng là ñi tcác hp cht thiên nhiên. Ngưꢐi ta  
có thsdng các hp cht thiên nhiên mt cách trc tip ñꢏ làm  
thuc, hoc sdng làm các mô hình ñꢏ nghiên cu tng hp các hot  
cht mi theo phương pháp phát trin thành thuc. Chúng còn ñưꢃc  
dùng như là ngun nguyên liu trc tip, gián tip hoc cung cp nhng  
cht ñꢚu cho công nghbán tng hp nhm tìm kim nhng cht mi,  
dưꢃc phm mi có hot tính, tác dng cha bnh tt hơn, hiu quhơn.  
Các sliu gn ñây cho thy rng, có khong 60% dưꢃc phm ñưꢃc  
dùng cha bnh hin nay, hoc ñang thcn lâm sàng ñꢝu có ngun  
gc tthiên nhiên.  
Vì vy, vic tip tꢙc nghiên cu thành phn a hꢍc, ng dꢙng c  
phương pháp hin ñꢄi như cng hưꢜng tꢑ hꢄt nhân, phkhi,... ñꢏ xác  
ñꢢnh cu trúc và nghiên cu hot tính sinh hc ca mt shp cht có  
giá trtrong các loài cây thuc chi nói trên Vit Nam mt hưꢈng  
nghiên cu nhiu trin vꢍng.  
2. Mc tiêu nghiên cu  
Lun văn này ñꢞt mc tiêu tìm hiu thành phn hóa hc và thăm dò  
hot tính sinh hc  
- Chit tách, phân lp và xác ñꢢnh cu trúc hóa hc ca các cht tꢑ  
dch chit n-hexan có trong thân cây cau chut núi.  
- Thhot tính sinh hc ca các dch chit và các cht sch tách  
ñưꢃc.  
3. Đꢑi tưꢣng và phm vi nghiên cu  
Trong lun văn này chúng tôi ñi sâu vào tách, tinh chvà xác ñꢢnh  
cu trúc ca mt sthành phn hóa hc trong dch chit n-hexan ca  
thân cây Cau Chut Núi.  
- Thân cây Cau Chut Núi thu hái tnh Hòa Bình.  
- Điu tra sơ b, thu thp, xlý nguyên liu.  
Tuy nhiên, phn ln c cây ñưꢃc sꢘ dꢙng m thuc trong dân  
gian chưa ñưꢃc nghiên cu ñꢚy ñꢖ và có hthng vmt a hꢍc ng  
như hoꢄt nh sinh hꢍc mà chyu da trên kinh nghim dân gian. Vì  
vy chưa phát huy ht ñưꢃc hiu quꢆ cꢖa ngun i nguyên quý giá này.  
Trong vô sloài thc vt Vit Nam, có nhiu loài cây thuc chi  
Pinanga ca hCau (Arecaceae) có giá trsdng cao, ñưꢃc dùng làm  
thuc cha nhiu bnh theo kinh nghim dân gian. Nhưng các công  
trình nghiên cu vthành phn hoá hc, hot tính ca các hp cht  
chính trong các cây thuc chi nói trên trong nưꢈc hu như rt ít, có  
- Chit các mu thc vt bng các dung môi có ñꢉ phân cc khác  
nhau.  
- Thhot tính sinh hc ca các dch chit thu ñưꢃc.  
- Chit tách , tinh chcác hp cht tcác dch chit.  
- Xác ñꢢnh cu trúc hóa hc các hp cht phân lp ñưꢃc.  
- Thhot tính sinh hc ca các hp cht thu ñưꢃc.  
4. Phương pháp nghiên cu  
4.1. Các phương pháp nghiên cu lý thuyt:  
- Phương pháp nghiên cu các hp cht thiên nhiên,  
5
6
- Tng quan tài liu vꢝ ñꢞc ñim thc vt, thành phn hóa hc, tác  
dng sinh hc ca các dch chit và các cht có trong thân cây Cau  
Chut Núi , các phương pháp chit tách và xác ñꢢnh thành phn hóa hc  
ca các hp cht thiên nhiên và hot tính sinh hc ca chúng.  
4.2. Các phương pháp nghiên cu thc nghim  
- Xlý mu: nguyên liu là thân cây cau chut núi ñưꢃc ct nhꢥ  
sy khô, xay nhꢥ  
- Nguyên liu ñã xꢘ lý ñưꢃc chit hi lưu vi các dung môi khác nhau  
như hexan, cloroform, metanol, etanol, nưꢈc... thu ñưꢃc c phn chit.  
- Thhot tính sinh hc ca các dch chit.  
- Phân lp, tách tinh chꢒ các cht bng phương pháp sc ký ct,  
sc ký lp mꢥng, sc lng trung áp, sc ký lꢥng hiu năng cao, c  
phương pháp kt tinh phân ñoꢄn.  
- c phương pháp khꢆo t cu trúc: kt hp c phương pháp ño  
phhng ngoi (IR), phtꢘ ngoꢄi (UV), MS, phcng hưꢜng tꢑ hꢄt  
nhân mt chiu (1D NMR): 1H-NMR, 13C-NMR, DEPT, cng hưꢜng tꢑ  
hꢄt nhân hai chiu (2D NMR): COSY, NOESY và các phương pháp  
khác ñꢏ tìm ra nhng ñꢞc trưng cu trúc tiêu biu ca mt shp cht  
phân lp ñưꢃc.  
- Phương pháp chit: ngâm, chit bng các dung môi có ñꢉ phân  
cc khác nhau. Như n-hexan , etylaxetat và methanol, n-butanol ñꢏ thu  
ñưꢃc các dch chit .  
- Thhot tính sinh hc ca các dch chit.  
- Phương pháp xác ñꢢnh thành phn hóa hc, ñꢢnh danh, tách và  
phân lp, xác ñꢢnh cu trúc các cu tchính bng các phương pháp sc  
ký khí ghép khi ph(GC-MS) , sc ký ct (SKC), sc ký bn mng  
(SKBM),1H-NMR, 13C-NMR, DEPT, COSY, HMBC, HSQC, IR, MS.  
5. Ni dung nghiên cu  
- c phương pháp thnghim hot tính sinh hc: thꢘ hoꢄt nh  
kháng khun, kháng nm, kháng oxi hoá, kháng tbào ung thư.  
6. Ý nghĩa khoa hc và thc tin ca ñꢠ tài  
Tcác kt qunghiên cu, lun văn ñã thu ñưꢃc mt skt quꢆ  
vi nhng ñóng góp thit thc sau:  
5.1. Nghiên cu lý thuyt  
- Tcác ngun tài liu khác nhau tìm hiu vhp cht thiên nhiên,  
các phương pháp chit tách và xác ñꢢnh thành phn hóa hc ca các hp  
cht thiên nhiên và hot tính sinh hc ca chúng.  
- Sơ lưꢃc hCau và tác dng ca mt scây thuc hCau.  
- Sơ lưꢃc cây cau chut núi, thành phn hóa hc và ng dng ca  
các bphn ca cây cau chut núi:  
- Nhng kt quꢆ vꢝ thành phn hóa hc và hot tính sinh hc ca  
các loài cây nghiên cu thuc chi Pinanga sꢦ ñóng góp vào kho tàng  
các hp cht thiên nhiên ca Vit Nam và thgii.  
- m hiu nhng ñꢞc trưng cu trúc ni bt cꢖa c hp cht có  
hoꢄt nh và khnăng bin ñꢠi cu trúc ñꢏ có hot tính tt hơn.  
- Tꢄo cơ skhoa hc cho vic sdng ngun thc vt ca Vit  
Nam mt cách hiu qu.  
+ Đꢞc ñim, phân bꢌ  
+ Công dng ca cây cau chut núi ñꢌi vi ñꢐi sng  
- Đꢞc ñim cây cau chut núi.  
7. Cu trúc lun văn  
Lun văn bao gm  
5.2. Nghiên cu thc nghim  
Chương 1 – TNG QUAN  
- Xlý mu: nguyên liu là thân cây cau Chut Núi ñưꢃc ra sch,  
sy khô và ñem xay nh.  
Chương 2 – CÁC NGHIÊN CU THC NGHIM  
Chương 3 – KT QUVÀ THO LUN  
7
8
CHƯƠNG 1  
TNG QUAN VMT SLOÀI  
TRONG HCAU (ARECACEAE)  
Đã tng quan các tài liu trong nưꢈc và trên thgii vnhng  
vn ñꢝ liên quan ñꢒn lun văn như:  
1.1. KHÁI QUÁT VHCAU  
1.1.1. Đꢩc ñim chung vhình thái ca hCau (Arecaceae)  
1.1.2. Phân loi hCau  
1.3.6. Mt scông dng khác  
1.4. CÁC NGHIÊN CU TRONG NƯꢰC VÀ TRÊN THGII  
VTHÀNH PHN HÓA HC VÀ HOT TÍNH SINH HC  
MT SLOÀI CÂY TRONG HCAU (ARECACEAE)  
1.4.1. Cây cau (Areca catechu L.)  
1.4.2. Cây CDu (Elaeis guineensis Jacq.)  
1.4.3. Cây Da (Cocos nucifera L.)  
1.4.4. CHLong (Livistona halongensis)  
1.1.3. Mt schi trong hCau  
1.1.4. Phân bca hCau  
1.4.5. CX(Livistona chinensis)  
1.4.6. Các nghiên cu vthành phn hóa hc và hot tính sinh  
hc mt sloài cây trong Chi Cau Chut  
1.1.5. Quá trình tin hóa ca hCau  
1.2. MT SCHI TRONG HCAU  
1.2.1. Chi cꢗ  
1.5. NHN XÉT CHUNG  
Hcau là mt hthc vt ln trên thgii và cꢆ ꢜ Vit Nam.  
Trong snhng loài ca hcau có Vit Nam thì chmi có rt ít loài  
ñưꢃc nghiên cu vhot tính sinh hc và thành phn hóa hc. Theo tài  
liu chúng tôi có ñưꢃc thì Vit Nam mi chcó cây cau, cây da và  
cây tht nt là ñưꢃc nghiên cu nhiu vhóa hc và hot tính sinh hc.  
Các cây còn li hu như chưa ñưꢃc nghiên cu cvhot tính dưꢃc lý  
ln thành phn hóa hc. Vì lý do ñó nên vic ñꢞt vn ñꢝ nghiên cu mt  
cách hthng vthành phn hóa hc và hot tính sinh hc ca mt sꢌ  
loài trong hcau là rt cn thit, có ý nghĩa khoa hc và thc tin cao.  
Đꢞc bit là nghiên cu các loài mi phát hin cho khoa hc và các loài  
ñꢞc hu ca Vit Nam.  
1.2.2. Chi Da  
1.2.3. Chi Cau Chut (Pinanga Blume)  
a. Đꢄc ñim chung ca chi Cau Chut  
b. Cau Chut núi  
c. Cau Chut Nam Bꢇ  
d. Cau Chut Bà Na  
e. Cau Chut Ba Vì  
f. Cau Chut ngưꢈc  
g. Cau Chut bn nhánh  
h. Cau Chut Trung Bꢇ  
1.3. GIÁ TRSDNG MT SLOÀI TRONG HCAU  
1.3.1. Trng làm cnh  
Các kt qunghiên cu sꢦ ñóng góp vào vic chng minh tính  
ña dng sinh hc ca thm thc vt Vit Nam.  
1.3.2. Dùng làm thuc cha bnh  
1.3.3. Ly si  
Đꢌi vi cây Cau Chut núi, ñꢌi tưꢃng nghiên cu ca lun văn  
này, là mt loài mi phát hin cho khoa hc. Nghiên cu mt cách ñꢚy  
ñꢖ vthành phn hóa hc và hot tính sinh hc ca cây Cau Chut núi  
sgóp phn tăng thêm giá trca di sn thgii.  
1.3.4. Ăn qu, ly ñưꢔng và tinh bt  
1.3.5. Cho du béo  
9
10  
CHƯƠNG 2  
Mt shoá cht khác cũng ñưꢃc sdng như CH3COOH, HCl,  
CÁC NGHIÊN CU THC NGHIM  
pyridin, anhydrit acetic ...  
2.1. NGUYÊN LIU, HÓA CHT, THIT BNGHIÊN CU  
2.1.1. Nguyên liu  
b. Thit bꢋ  
Các thit bxác ñꢢnh cu trúc cht:  
Nguyên liu ñꢏ nghiên cu trong lun văn này là: Mu cây  
Pinanga duperreana ñưꢃc thu hái ti Hòa Bình vào tháng 8 năm 2009  
và do CN. Ngô Văn Tri, Vin Dưꢃc liu, BY txác ñꢢnh tên khoa  
hc.  
-
-
Phkhi HP 5989B MS Engine, LC/MSD Agilent ca Vin Hóa  
hc, Vin Khoa hc và Công nghVit Nam.  
1
Phcng hưꢜng tht nhân H–NMR, 13C–NMR ño trên máy  
Bruker Avance–500 MHz, cht ni chun là TMS cho 1H–NMR và  
tín hiu dung môi (DMSO) cho 13C–NMR ca Vin Hóa hc, Vin  
Khoa hc và Công nghVit Nam.  
Mu tiêu bn ñưꢃc lưu giti phòng tng hp hu cơ, Vin  
Hoá hc – Vin KHCN Vit Nam s18 Hoàng Quc Vit, Cu Giy,  
Hà Ni. Thân cây sau khi thu hái ñưꢃc ra sch, phơi, sy khô ri xay  
thành bt ñꢏ chit ln lưꢃt vi các dung môi n–hexan, diclometan và n-  
butanol (BuOH).  
-
-
-
-
Phhng ngoi (FT–IR) ño dưꢈi dng viên nén KBr trên trên máy  
quang phIMPACT 410 ca hãng Nicolet, Hoa Kì ti Vin Hóa  
hc, Vin Khoa hc và Công nghVit Nam.  
2.1.2. Hóa cht, thit bnghiên cu  
Đèn tngoi (UV BIOBLOCK) bưꢈc sóng λ = 254nm và 365nm  
dùng ñꢏ soi bn mng ñꢞt ti phòng tng hp hu cơ, Vin Hóa  
hc, Vin Khoa hc và Công nghVit Nam.  
a. Hóa cht  
Sc kí lp mng sdng bn mng nhôm tráng sn silicagel  
Merck 60GF254, ñꢉ dày 0,2mm và bn mng ngưꢃc pha RP–18. Sc ký  
ct thưꢐng: silicagel cht 197 – 400 mesh (0,040 – 0,063mm) cho ct  
ñꢚu. Sc ký ct nhanh: silicagel cht 70 – 200 mesh cho ct tip theo.  
Dung môi ñưꢃc ct li qua ct Vigreux trưꢈc khi sdng.  
Phân lp các cht bng phương pháp sc kí ct vi cht hp phꢙ  
là silicagel cht 0,040 – 0,063mm Merck.  
Phkhi phân gii cao HR – ESI – MS ñưꢃc ño trên máy Varian  
FT – ICR – MS ca Hoa Kti Vin Hóa hc, Vin Khoa hc và  
Công nghVit Nam.  
Ngoài ra còn dùng mt strang thit bkhác như máy quay ct  
chân không ca hãng Buchi, Thy Sĩ, máy sy, máy siêu âm, các  
dng cthutinh, v.v... ca Cng Hòa Liên Bang Đꢟc.  
Thuc thphun lên bn mng chyu sdng Vanilin 1%  
trong dung dch metanol – H2SO4 ñꢞc, sau ñó sy nhit ñꢉ khong  
1100C.  
2.2. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CU  
2.2.1. Phương pháp chit mu thc vt  
2.2.2. Phương pháp tách và tinh chcht  
2.2.3. Phương pháp xác ñꢴnh cu trúc hóa hc ca các cht  
2.2.4. Phương pháp thăm dò hot tính sinh hc  
a. Hot tính gây ñꢇc tbào  
Dung môi dùng chy ct và trin khai sc kí lp mng bao gm  
n–hexan, CH2Cl2, EtOAc và MeOH loi tinh khit ñã ñưꢃc ct li qua  
ct Vigereux trưꢈc khi sdng ñꢏ loi btp cht, cht làm mm.  
b. Phương pháp thhot tính kháng oxi hóa  
11  
12  
2.2.5. Phương pháp la chn cht hp phvà dung môi chy ct  
sc kí  
Nguyên liu(Thân cây Cau Chut núi sy  
khô, xay nhꢥ ñưꢃc 2600 gam bt khô)  
a. Chn cht hp phꢏ  
b. La chn dung môi chy ct sc kí  
MeOH/ H2O 85: 15 (V/V)  
2.2.6. Tlgia lưꢣng mu cht cn tách vi kích thưꢕc ct  
a. Tlgia lưꢈng mu cht cn tách vi lưꢈng silicagel sꢍ  
Ct loi bt dung  
dng  
Dch chit có nưꢈc  
b. Tlgia chiu cao lưꢈng silicagel và ñưꢗng kính trong  
ca ct sc kí  
Chit bng các dung môi có ñꢉ phân cc khác  
2.2.7. Cách np silicagel vào ct  
a. Np silicagel dng st  
nhau n – hexan, diclometan, BuOH  
b. Np silicagel dng khô  
2.2.8. Cách np mu vào ct  
a. Phương pháp khô  
Các cn chit  
Các dch chit  
b. Phương pháp ưꢕt  
Chy ct sc ký ct kt hp sc kí  
bn mng ñꢏ tách các cht  
Thhot tính sinh hc  
2.3. CÁC NGHIÊN CU THC NGHIM  
2.3.1. Sơ ñꢮ thc nghim  
Quá trình thc nghim chung ñưꢃc mô tnhư ꢜ hình 2.4  
Ph(IR, MS, 1H – NMR, 13C – NMR  
…) ñꢏ xác ñꢢnh cu trúc phân tꢘ  
Thhot tính sinh hc  
Thành phn hóa hc và hot tính sinh hc  
Hình 2.4. Sơ ñꢀ thc nghim  
13  
14  
CHƯƠNG 3  
Thân cây Cau Chut núi (2600 gam bt khô)  
KT QUVÀ THO LUN  
Ngâm chit trong (M/W = 85 /15) 3 ln.  
3.1. KT QUTHHOT TÍNH SINH HC  
Chúng tôi tin hành kim tra hot tính sinh hc bao gm hot  
tính chng oxy hóa và hot tính gây ñꢉc tbào ung thư ngưꢐi ca dch  
chit n – hexan và dch chit diclometan ca thân cây cau Chut núi.  
Kt quꢆ ñưꢃc ñưa ra dưꢈi ñây.  
Dch nưꢈc  
Chit ln lưꢃt vi các dung môi: n – hexan,  
diclometan, butanol.  
3.1.1. Hot tính chng oxi hoá  
2,2 gam  
Kt quthhot tính chng oxi hoá ñưꢃc ñưa ra bng 3.1.  
Bng 3.1. Kt quthhot tính chng oxi hoá.  
5,1 gam  
50 gam  
% c chhot ñꢉng ca enzym  
Hình 2.5. Sơ ñꢀ chit mu thân cây Cau Chut núi  
Phn cao n–hexan (lng) màu nâu ñưꢃc tip tc chy ct sc kí  
ñꢊng thi kt hp vi chy GC – MS ñꢏ xác ñꢢnh và ñꢢnh danh thành  
phn hoá hc.  
Nng ñꢉ cht thꢘ  
Peroxydara  
(µg/ml)  
PDTN  
19  
PDTD  
19  
128  
32  
8
2
0,5  
14  
0
12  
7
0
0
2.3.2. Chy ct sc kí phn cao n- hexan  
Các phân ñon còn li khi chm bn mng thy không khthi  
0
0
IC50 (µg/ml)  
> 128  
> 128  
lm nên chưa ñưꢃc nghiên cu.  
Theo kt quꢆ ꢜ bng 3.1 ta thy rng các dch chit n –hexan và  
diclometan ca thân cây cau Chut núi thu tnh Hòa Bình ca Vit  
Nam không có hot tính chng oxi hóa. Các cht có IC50 > 128 µg/ml  
ñưꢃc coi là không có hot tính chng oxi hóa.  
5,1 gam cao n – hexan  
H.PD2/13 (m = 175 mg)  
H.PD 8 /13(m = 400 mg)  
Chy ct Silicagel Hdung môi:  
3.1.2. Hot tính gây ñꢥc tbào  
Chy ct Silicagel Hdung môi:  
Kt quthhot tính gây ñꢉc tbào ca các dch chit tthân  
cây Cau Chut núi ñưꢃc ñưa ra bng 3.2.  
H.PD2.3 /3(m = 15 mg)  
Chy ct Silicagel Hdung môi:  
Bng 3.2. Kt quthhot tính gây ñꢅc tbào  
IC50 (µg/ml)  
PDH3  
PDH2  
STT  
Tên mu  
PDH 1.1  
KB  
LU  
MCF–7  
> 128  
Hep. G2  
> 128  
1
2
PDTN  
PDTD  
> 128  
> 128  
> 128  
> 128  
Hình 2.7 – Phân lp và tinh chcht sch tcác phân ñon ca dch chit n –  
hexan.  
> 128  
> 128  
15  
16  
b. Cht PDH3  
Theo kt quꢆ ꢜ bng 3.2 ta thy, các dch chit n – hexan, và  
diclometan không có hot tính c chcác dòng tbào ung thư thnghim.  
Tuy vy chúng tôi vn tin hành tách và xác ñꢢnh cu trúc ca  
các cht hóa hc tdch chit n – hexan ca thân cây này. Rt có thꢏ  
cht sch tách ñưꢃc sthhin hot tính.  
PDH3, cht rn màu trng, Rf = 0,69 ( n – Hexan : diclometan =  
1/4 ), hiu sut 0,0039% so vi mu khô, là hn hp ca - sitosterol  
(PDH3a) và stigmasterol (PDH3b).  
1
PhH – NMR (500 MHz, CDCl3):  
5,34 – 5,35 (2H, m),  
H
5,15 (1H , dd, J = 8,6; 15,1), 5,02 (1H, dd, J = 8,7; 15,1), 3,49 – 3,54  
(2H, m), 2,20 – 2,30 (4H, m), 1,95 – 2,06 (5H, m), 1,81 – 1,86(5H, m),  
1,68 – 1,72 (2H, m), 1,29 – 1,45 (20H, m), 1,09 – 1,20 (4H, m), 1,02  
(3H, d, J = 6,63), 1,01 (3H, s), 0,91 (3H, d, J = 6,25), 0,78 (3H, d, J =  
3.2. XÁC ĐꢄNH CU TRÚC CÁC CHT TÁCH ĐƯꢋC  
T5,1 gam dch chit n – hexan ca thân cây cau Chut núi,  
sau khi chy sc ký ct nhc li nhiu ln vi hdung môi ra gii là n  
– hexan : EtOAc vi ñꢉ phân cc (% EtOAc) tăng dn chúng tôi thu  
ñưꢃc mt cht kt tinh hình kim màu trng ký hiu là PDH3 và mt cht  
dng du ký hiu là PDH2. Các sliu phca các cht này ñưꢃc ñưa  
7,43), 0,83 – 0,89 (6H, m), 0,69 (3H, s).  
13  
PhC – NMR (125 MHz, CDCl3):  
140,68; 138,30; 129,  
C
29; 121, 71; 71,8; 56,87; 56,77; 55,97; 51,24; 50,15; 45,90; 42,32;  
42,21; 42,13; 40,47; 39,78; 39,69; 37,25; 36,50; 34,06; 32,40; 31,91;  
31,77; 31,49; 24,72; 24,70; 22,68; 21,07; 19,79; 19,04; 14,08; 14,04.  
PhESI-MS ion dương ca cht PDH3 cho các pic ti m/z =  
414,8 [M]+ ca β – Sitosterol (C30H50O) và m/z = 395,8 [M+1 - H2O] +  
tính theo stigmasterol (C30H48O). Pic m/z= 395,8 là pic cơ bn, hình  
thành do to thành dn xut dien liên hp (3,5-dien) sau khi phân tꢘ  
cht PDH3 btách mt phân tnưꢈc, như vy khi lưꢃng phân tca  
cht PDH3 là 414 và 412 phù hp vi công thc C29H50O và C29H48O  
ca hai phytosterol như trên.  
ra dưꢈi ñây.  
3.2.1. Sliu phca các cht tách ñưꢣc  
a. Cht PDH2  
PDH2, cht dng du vi hdung môi n–hexan : EtOAc = 1 : 1  
PhIR: KBr (cm-1) 3443 (OH), 3010 và 3050 (=CH-), 2921  
υ
-
và 2872 (- CH2, - CH3), 1664 và 1510  
C
C
(
-
), 1460 (- CH2, - CH3), 1043 (C=O).  
Ph1H – NMR (500 MHz, CDCl3):  
ppm : 5, 32 – 5,39 (m, 1,7H), 2,77 (1H, m), 2,35 (2H, m),  
δ
3.2.2. Xác ñꢴnh cu trúc ca các cht tách ñưꢣc  
2,05 (2H, m), 1,64 (2,7H, m), 1,25 – 1,32 (19H, m), 0,88  
(5H, d).  
a. Cht PDH2  
-
-
Ph13C – NMR (125 MHz, CDCl3):  
δ
ppm : 126,92 (=CH); 1270 (=CH); 129,0 (=CH); 129,2  
(=CH); 75,9 (CH-OH); 30,9; 30,5; 28,0 – 28,7; 26,2; 24,6;  
23,7; 21,7; 21,6 (tt clà –CH2); 13,0 (-CH3).  
Qua sliu phIR và NMR thy rng cht PDH2 là mt  
hn hp gm hai ancol béo bc hai, mi ancol cha mt ni  
ñôi. Hai ancol này có cu trúc gn ging nhau.  
Hình 3.1. PhIR ca cht PDH2  
17  
18  
Hình 3.5. Phcng hưꢐng tht nhân 13C-NMR ca cht PDH2  
Hình 3.2. Phcng hưꢐng tht nhân 1H–NMR (500 MHz, DMSO)  
ca cht PDH2  
Hình 3.6. Phcng hưꢐng tht nhân 13C-NMR ca cht PDH2  
Hình 3.3. Phcng hưꢐng tht nhân 1H–NMR (500 MHz, DMSO)  
ca cht PDH2  
Hình 3.7. Ph13C-NMR và phDEPT ca cht PDH2  
b. Cht PDH3  
1
PDH3 ñưꢃc phân lp dưꢈi dng cht rn màu trng. PhH –  
NMR ca nó cho thy tín hiu ca 2 metyl singlet ti H 1,01 và 0,69; 1  
nhóm metyl triplet ti H 0,87 cùng vi 3 metyl doublet ti H 1,02 (3H,  
d, J = 6,63), 0,91 (3H, d, J = 6,25) và 0,78 (3H, d, J = 7,43). Ngoài ra,  
Hình 3.4. Phcng hưꢐng tht nhân 13C-NMR ca cht PDH2  
19  
20  
các tín hiu proton olephin ti H 5,34 – 5,35 (2H, m), 5,15 (1H, dd, J =  
8,6; 15,1), 5,02 (1H, dd, J = 8,7 : 15,1) và tín hiu ca các nhóm metin  
mang oxi ti H 3,49 – 3,54 (2H, m) cũng ñưꢃc quan sát thy. Các tín  
hiu ca các proton còn li cng hưꢜng chng chp trong khong  
H
0,80 – 2,34. Ph13C – NMR và phDEPT cho tín hiu cng hưꢜng ca  
29 cacbon, trong ñó có 3 cacbon bc bn, 11 cacbon bc ba, 9 cacbon  
13  
bc hai và 6 nhóm metyl. PhC – NMR chra tín hiu ca 4 cacbon  
olefin ( C 140,69; 138,30;129,29;121,72) và mt nhóm metin mang oxi  
ti C 71,84. Tín hiu ca các nhóm metyl xut hin ti C 21,21; 21,08;  
19,37; 18,98 và 14,08. Tín hiu ca các nhóm metin và metilen còn li  
nm trong khong C 22,68 – 56,87. So sánh sliu phNMR ca hp  
cht thu ñưꢃc vi tài liu tham kho [32], ñã xác ñꢢnh ñây là hn hp  
ca hai cht - sitosterol (PDH3a) và stigmasterol (PDH3b).  
Hình 3.8. PhIR ca hn hp stigmasterol và β – Sitosterol  
1
Trên phH – NMR ca hn hp hai cht này, tlꢇ ñưꢐng tích  
phân ca các proton ti H 5,34 (H – 6), 5,15(H – 22), 5,02(H – 23) và 3,51  
(H -3) là 2:1:1:2. Do ñó có thxác ñꢢnh tltương ñꢌi ca - sitosterol  
(PDH3a) và stigmasterol (PDH3b) trong hn hp thu ñưꢃc là 1: 1.  
Trong gii thc vt  
- sitosterol và stigmasterol là hai  
phytosterol rt hay ñi cùng nhau. Chúng hay to thành tinh thhn hp  
do ñꢊng kt tinh vi tl1: 1. Do vy hai cht này kt tinh dng tinh  
thvà hu như không tách ra khi nhau ñưꢃc qua các phương pháp sc  
ký. Tuy nhiên, ngày nay vi phương pháp phcng hưꢜng tht nhân  
13  
1H và C – NMR ngưꢐi ta có thxác ñꢢnh ñưꢃc ht nhân này dng  
hn hp. Chúng chhơn kém nhau mt ni ñôi mch nhánh.  
- sitosterol và stigmasterol tn ti phbin trong thc vt và nm.  
Trong du ñꢅu tương có ti 25% stigmasterol phn không thy phân. Ngày  
nay ngưꢐi ta sdng hai phytosterol này ñꢏ sn xut dưꢃc phm, ñꢞc bit là  
các thuc steroit qua mt sbưꢈc, phn ng enzym và phn ng hóa hc.  
Ngoài ra chúng còn có nhiu hot tính dưꢃc lý quý khác.  
Hình 3.9. PhMS ca hn hp stigmasterol và β – Sitosterol  
21  
22  
Hình 3.12. Mt phn phcng hưꢐng tht nhân 1H-NMR ca hn hp  
stigmasterol và β – Sitosterol  
Hình 3.10. Phcng hưꢐng tht nhân 1H–NMR (500 MHz, DMSO)  
ca hn hp stigmasterol β – Sitosterol  
Hình 3.11. Phcng hưꢐng tht nhân 1H–NMR (500 MHz, DMSO)  
ca hn hp stigmasterol và β – Sitosterol  
Hình 3.13. Phcng hưꢐng tht nhân 13C-NMR ca hn hp  
stigmasterol và β – Sitosterol  
23  
24  
3
71,8  
3,51 (1H, m,  
71,8  
3,49(1H, m,  
H-3)  
71,80 3,49(1H, m, H-3)  
H-3α)  
4
5
6
42,35  
140,68  
121,71 5,35 (d, J=  
5,4 Hz, H-6)  
31,91  
42,33  
140,76  
121,69  
42,18  
140,67  
5,33(1H, dd, 121,70 5,33(1H, dd, J=5,  
J=5, 2Hz, H-6)  
2Hz, H-6)  
7
8
9
31,92  
31,92  
50,15  
36,51  
21,1  
39,80  
42,33  
56,78  
24,31  
29,18  
56,08  
11,99  
31,87  
31,87  
50,12  
36,40  
21,06  
39,66  
42,18  
56,83  
24,35  
28,92  
55,91  
31,77  
50,15  
10 36,50  
11 21,1  
12 39,78  
13 42,32  
14 56,87  
15  
24,4  
16 28,87  
17 56,02  
18 12,10 0,70 (3H, s,  
H-18)  
Hình 3.14. Mt phn phcng hưꢐng tht nhân 13C-NMR giãn rng  
ca hn hp stigmasterol và β – Sitosterol  
0,69(3H, s, H- 12,1  
0,69(3H, s, H-18)  
18)  
19  
19,4  
1,01 (3H, s,  
H-19)  
19,39  
1,01(3H, s, H- 19,39 1,01(3H, s, H-19)  
19)  
20 40,47  
21 21,2  
40,5  
21,2  
40,5  
21,22  
1,02 (3H, d,  
J=6,7 Hz, H-  
21)  
0,92(3H, d,  
J=6,5Hz, H-  
21)  
0,92(3H, d,  
J=6,5Hz, H-21)  
22 138,30 5,02 (1H, dd,  
J=8,7, 15,2  
Hz, H-22)  
23 129,29 5,16 (1H, dd,  
J=8,6, 15,2  
138,3  
129,3  
5,03(1H, dd, 138,25  
J=15,5Hz,  
8,5Hz, H-22)  
5,03(1H, dd,  
J=15,5Hz, 8,5Hz,  
H-22)  
5,11 (1H,  
J=15,5Hz, 8,5Hz,  
5,11 (1H,  
J=15,5Hz,  
129,19  
Hz, H-23)  
8,5Hz, H-23)  
H-23)  
24 51,24  
25 31,91  
26 19,04 0,85 (3H, d,  
J=6,4 Hz, H-  
51,3  
31,92  
19,0  
51,21  
31,87  
19,0  
0,84(3H, d,  
J=6,5Hz, H-  
26)  
0,84(3H, d,  
J=6,5Hz, H-26)  
Hình 3.15. Ph13C-NMR và phDEPT ca hn hp stigmasterol và β –  
26)  
27 21,07 0,798 (3H, d,  
J=6,4 Hz, H-  
21,1  
12,3  
0,81(3H, d,  
J=6,5Hz, H-  
27)  
21,06  
0,81(3H, d,  
J=6,5Hz, H-27)  
Sitosterol  
Bng 3.3: So sánh ph13C-NMR ca hp cht PDH3 vi β Sitosterol và  
stigmasterol  
27)  
28  
29  
25,4  
12,2  
25,4  
12,26  
0,81 (3H, t,  
J=7,5 Hz, H-  
29)  
0,85(3H, t,  
J=7,1Hz, H-  
29)  
0,85(3H, t,  
J=7,1Hz, H-29)  
STT  
Hp cht PDH3  
β – Sitosterol  
Stigmasterol  
[11]  
[11],[27], [28], [34]  
C
1
δC  
37,25  
δH (J=Hz)  
δC  
37,27  
δH (J=Hz)  
δC  
37,24  
δH (J=Hz)  
2
31,70  
31,92  
31,87  
25  
26  
3.3. NHN XÉT VTHÀNH PHN HÓA HC CA CÂY CAU  
CHUT NÚI (PINANGA DUPERREANA)  
Thành phn hoá hc  
Tdch chit n – hexan ca thân cây Cau Chut Núi (Pinanga  
duperrana), chúng tôi ñã tách và xác ñꢢnh ñưꢃc cu trúc hn hp cht  
trong thân cây Cau Chut núi.  
Vit Nam và trên thgii, ñây là ln ñꢚu tiên cây P.  
duperreana ñưꢃc nghiên cu vthành phn hóa hc và hot tính chng  
oxy hóa và gây ñꢉc tbào ung thư ngưꢐi. Kt qucho thy thành phn  
hóa hc ca cây này cha các lp cht khác nhau, trong ñó lưꢃng cht  
phân cc mnh chim lưꢃng ln (dꢓ ñoán là ñưꢐng saponin và  
glucosid) và rt khó tách. Tuy nhiên, ñây mi chlà các kt qunghiên  
cu ban ñꢚu, có thdùng làm tư liu tham kho cho các nghiên cu tip  
theo vchi Pinanga.  
Cht PDH3 dng tinh thlà hn hp ca  
- sitosterol  
(PDH3a) và stigmasterol (PDH3b) ñꢊng kt tinh theo tl1:1.  
Stigmasterol và β-sitosterol là hp cht thiên nhiên có hot tính sinh  
hc, tn ti khá phbin trong gii thc vt  
Hn hp Stigmasterol và - Sitosterol trong thân cây Cau Chut  
núi có mt stác dng sinh hc như: có tác dng chng oxi hóa, gim  
cholesterol trong máu và làm tăng hàm lưꢃng cht HDL – C (high density  
lipid – cholesterol) là thành phn quan trng ñꢏ bo vtim mch, phòng  
chng xơ va ñꢉng mch, tăng sc ñꢝ kháng cho cơ th, các nghiên cu  
vstigmasterol còn chra rng cht này còn có tác dng phòng chng  
ung thư nht ñꢢnh như: ung thư tuyn tin lit, ung thư vú, rut già,…  
Đây là ln ñꢚu tiên các cht này ñưꢃc phân lp tthân cây Cau  
Chut Núi (Pinanga duperrana) thuc hCau Vit Nam.  
2. Kin nghꢴ  
KT LUN VÀ KIN NGHꢄ  
1. Kt lun  
Qua quá trình tin hành tìm kim thông tin vꢝ ñꢝ tài, tôi ñã  
bưꢈc ñꢚu cung cp ñưꢃc nhng thông tin vngun gc, ñꢞc ñim, thành  
phn hoá hc ca cây Cau chut núi, và mt vài công dng ca thân cây  
Cau Chut núi.  
Trong khuôn khꢠ ñꢝ tài lun văn thc sĩ, chúng tôi mi chꢛ  
nghiên cu ñưꢃc thành phn hoá hc và hot tính sinh hc ca cây  
Pinanga duperrana vi các kt quꢆ ñꢄt ñưꢃc như sau:  
Thăm dò hot tính sinh hc  
Nghiên cu thành phn hoá hc và hot tính sinh hc ca cây  
Pinanga duperrana, vì ñây là loài cho ñꢃn nay vn chưa ñưꢒc nghiên cu.  
Kt qukho sát cho thy có shin din ca - sitosterol và  
stigmasterol trong cây Cau Chut Núi là tín hiu vui cho ngưꢗi sꢍ  
dng, tuy nhiên ñꢙ có thsdng mt cách ñúng ñꢚn vcây Cau Chut  
núi cũng cn có nhng kho sát nhiu hơn na.  
Các dch chit n–hexan (PDTN), diclometan (PDTD) tthân  
cây Cau Chut Núi (Pinanga duperrana) ñã ñưꢃc thhot tính sinh  
hc. Các dch chit n –hexan và diclometan không có hot tính chng  
oxi hóa. Các dch chit n – hexan, và diclometan không có hot tính c  
chcác dòng tbào ung thư thnghim.  
Phân lp các phân ñon còn li ca dch chit n – hexan và  
chy ct sc kí kt hp vi GC/MS phn cao n–hexan ñꢙ xác ñꢋnh thành  
phn hoá hc. Đꢀng thi thhot tính sinh hc ca các cht tách ñưꢒc  
ñꢙ có cái nhìn tng thvhoá thc vt cũng như hot tính sinh hc ca  
thân cây Cau Chut Núi.  
Đây là ln ñꢚu tiên các hot tính sinh hc này ca các dch chit  
n – hexan, diclometan tthân cây Cau Chut Núi (Pinanga duperrana)  
ñưꢃc nghiên cu.  
pdf 13 trang yennguyen 31/03/2022 5640
Bạn đang xem tài liệu "Tóm tắt Luận văn Nghiên cứu phân lập và xác định cấu trúc một số hợp chất hóa học trong một số dung môi của thân cây cau chuột núi (Pinanga duperreana) thuộc họ cau (Arecaceae)ởtỉnh Hòa Bình của Việt Nam", để tải tài liệu gốc về máy hãy click vào nút Download ở trên

File đính kèm:

  • pdftom_tat_luan_van_nghien_cuu_phan_lap_va_xac_dinh_cau_truc_mo.pdf