Phát hiện DNA Mycobacterium Tuberculosis trong mẫu phết niêm mạc miệng với kỹ thuật Real-time PCR trong chẩn đoán lao phổi
vietnam medical journal n01 - MAY - 2021
nghiên cứu biến đổi hình thái của gan chuột lipid trong bào tương tế bào gan chuột khi uống
cống trắng khi nhiễm độc cấp thuốc trừ sâu nước sắc lá sen khô. Lượng lipid giảm dần theo
Bassa đã được công bố năm 2001. Ở lô chuột số ngày chuột được uống nước sắc lá sen.
thực nghiệm có sự thay đổi hình thái các tế bào
TÀI LIỆU THAM KHẢO
gan và lượng lipid trong bào tương các tế bào
1. Bùi Thanh Thủy (2001), Nghiên cứu biến đổi
gan, các tế bào nhiều lipid tập trung chủ yếu ở
hình thái gan chuột cống trắng sau nhiễm thuốc
ngoại vi của tiểu thùy gan và lượng lipid trong
bào tương tế bào giảm dần theo thời gian chuột
được uống nước sắc lá sen khô, chứng tỏ nước
lá sen khô có tác dụng đối với việc giảm mỡ
trong gan. Tuy nhiên, các nghiên cứu về lá sen
trong việc giảm lượng mỡ có trong gan vẫn đang
được các nhà khoa học nghiên cứu, một nghiên
cứu khác trên chuột cũng cho thấy lượng
cholesterol toàn phần trong huyết thanh và gan,
cholesterol tự do và phospholipids so với nhóm
đối chứng chứa nhiều chất béo giảm mạnh.
Ngoài ra, Flavonoid chất chiết xuất từ lá sen khô
này còn làm giảm tổn thương gan do lượng lipid
nhiều gây ra, điều này giải thích kết quả nghiên
cứu của chúng tôi không thấy hình ảnh tế bào
gan bị phá hủy, tổn thương.
trừ sâu Bassa, Luận văn cao học, Trường Đại học
Y Hà Nội.
2. Bùi Thanh Thủy, Nguyễn Thị Hiệp Tuyết
(2011), Nghiên cứu cấu trúc mô học gan chuột
nhiễm độc cấp thuốc trừ sâu nhóm carbamat sau
giải độc bằng cam thảo lục đậu thang, Tạp chí
Khoa học &Công nghệ Đại học Thái Nguyên, tập
89, Số (01)/2, 2012.
associated
with
non-alcoholic
liver
injury
progression in high fat diet induced obese rats.
Lipids Health Dis. 2016 Feb 11;15:27
liver disease research. Prog Lipid Res. 2015
Jul;59:106-25.
V. KẾT LUẬN
Từ kết quả nghiên cứu thực nghiệm trên
chuột cống trắng cho thấy có sự thay đổi lượng
PHÁT HIỆN DNA MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS TRONG MẪU
PHẾT NIÊM MẠC MIỆNG VỚI KỸ THUẬT REAL-TIME PCR
TRONG CHẨN ĐOÁN LAO PHỔI
Trần Phước Thịnh1,2, Nguyễn Hữu Lân3,
Lê Văn Chương1,4, Vũ Quang Huy1,4
Mycobacterium tuberculosis trong mẫu phết niêm mạc
TÓM TẮT40
miệng bằng kỹ thuật real-time PCR và so sánh với xét
nghiệm Xpert MTB/RIF Ultra (Xpert MTB) mẫu đàm.
Kết quả: Độ nhạy và độ đặc hiệu của mẫu phết niêm
mạc miệng là 74,4% và 100%. Mật độ vi khuẩn thấp,
ăn uống trước lấy mẫu là những yếu tố có liên quan
đến sự âm tính giả của mẫu phết niêm mạc miệng. Ở
những bệnh nhân phải lấy đàm kích thích hoặc nộp
đàm trễ thì mẫu phết niêm mạc miệng cũng phát hiện
DNA vi khuẩn ở 10/14 và 9/12 trường hợp theo thứ tự
tương ứng. Kết luận: Nghiên cứu đã cho thấy tính
khả thi của mẫu phết niêm mạc miệng và tiềm năng
bổ sung cho mẫu đàm nhằm cải thiện về thời gian
chẩn đoán và giảm tỷ lệ bệnh nhân phải chịu một số
thủ thuật xâm lấn trong chẩn đoán lao phổi.
Mục tiêu: Xác định giá trị chẩn đoán của xét
nghiệm phát hiện DNA Mycobacterium tuberculosis
trong mẫu phết niêm mạc miệng của bệnh nhân nghi
ngờ mắc lao phổi bằng kỹ thuật real-time PCR và
phân tích một số yếu tố liên quan. Đối tượng và
phương pháp nghiên cứu: Nghiên cứu mô tả cắt
ngang được thực hiện trên 85 bệnh nhân là người
trưởng thành, nghi ngờ mắc lao phổi. Phát hiện DNA
1Đại học Y Dược Thành phố Hồ Chí Minh
2Trường Đại học Y Dược Cần Thơ
3Bệnh viện Phạm Ngọc Thạch
4Trung tâm Kiểm chuẩn chất lượng xét nghiệm y học,
Bộ Y tế, Đại học Y Dược TP. HCM.
Chịu trách nhiệm chính: Vũ Quang Huy
Email: drvuquanghuy@gmail.com
Ngày nhận bài: 4.3.2021
Từ khóa: Lao phổi, phết niêm mạc miệng, real-
time PCR, Xpert MTB/RIF, sinh học phân tử.
SUMMARY
DETECTION OF DNA MYCOBACTERIUM
TUBERCULOSIS IN ORAL SWAB BY THE
Ngày phản biện khoa học: 23.4.2021
Ngày duyệt bài: 4.5.2021
166
TẠP CHÍ Y h c vi t nam tẬP 502 - th ng 5 - s 1 - 2021
REAL-TIME PCR TECHNIQUE FOR
I. ĐỐITƯỢNGVÀPHƯƠNGPHÁPNGHIÊNCỨU
2.1. Đối tượng nghiên cứu. Nghiên cứu
được thực hiện trên bệnh nhân trên 18 tuổi, có
triệu chứng nghi ngờ mắc lao phổi đến khám tại
Bệnh viện Phạm Ngọc Thạch từ tháng 2 đến
tháng 4 năm 2020.
PULMONARY TUBERCULOSIS DIAGNOSIS
Objectives: Determination of the diagnostic value
of detection of Mycobacterium tuberculosis DNA in the
oral swab of patients who were suspected of having
pulmonary tuberculosis by real-time PCR and analysis
of several related factors. Methods and Materials:
A cross-sectional study was conducted on 85 adult
patients who suspected of pulmonary tuberculosis.
Detect DNA Mycobacterium tuberculosis in samples of
oral swab by real-time PCR and compare this to the
sputum testing - Xpert MTB / RIF Ultra (Xpert MTB).
Results: The sensitivity and specificity of oral swab
sample were 74,4% and 100%. The patients with low
loading of bacteria as well as eating, drinking before
collecting sample could affect to the ability to detect
DNA Mycobacterium tuberculosis in oral swab.
Patients who could not expectorate sputum at the
time of examination must spray aerosol for induced
sputum or submit sputum later (1-3days). The sample
of oral swab also detected bacterial DNA in 10/14
cases in a group using the aerosol spray and 9/12 in a
group of late applying sputum. Conclusions:
Preliminary research has identified the ability to detect
2.2. Phương pháp nghiên cứu
Thiết kế nghiên cứu: Nghiên cứu mô tả cắt
ngang với phương pháp lấy mẫu thuận tiện
không xác suất, tất cả những bệnh nhân đủ tiêu
chuẩn nghiên cứu đều có thể được lựa chọn đưa
vào nghiên cứu.
Phương pháp thu thập số liệu
- Bệnh nhân có triệu chứng nghi ngờ mắc lao
phổi xác định qua các triệu chứng lâm sàng hoặc
hình ảnh Xquang ngực theo Hướng dẫn của
Chương trình chống lao Quốc gia.
- Tiến hành lấy 01 mẫu phết niêm mạc miệng
ngay trước khi bệnh nhân được hướng dẫn đi lấy
mẫu đàm.
- Ghi nhận kết quả xét nghiệm đàm (Xpert
MTB và soi nhuộm AFB trực tiếp) và phương
pháp lấy mẫu đàm đã thực hiện.
tuberculosis bacterial DNA in oral swab with
a
significant proportion and high specificity. This
sampling method has the potential to complement for
sputum samples to reduce diagnostic time and the
proportion of patients who suffer from some invasive
procedures.
2.3. Kỹ thuật lấy và xử lý mẫu phết niêm
mạc miệng
- Yêu cầu bệnh nhân mở miệng, đưa lưỡi ra
phía trước và hạ thấp để lộ rõ phần niêm mạc
miệng vùng 1/3 sau mặt lưng lưỡi, dùng tăm
bông vô trùng Rayon vừa chà xát vừa phải vừa
xoay đều đặn đầu tăm bông khoảng 7-8 giây
tương đương 10 lần chà xát để thu thập tế bào
bám trên niêm mạc miệng, cho que tăm bông
vào tube chứa và đậy kín nắp.
- Mẫu phết niêm mạc miệng sau khi lấy được
bảo quản ngay ở nhiệt độ 2 - 8OC trong điều
kiện khô cho đến khi được ly trích DNA toàn bộ
(không quá 24 giờ kể từ lúc lấy mẫu).
Keywords: Pulmonary tuberculosis, oral swab,
real-time PCR, Xpert MTB/RIF, molecular biology.
I. ĐẶT VẤN ĐỀ
Đàm là mẫu bệnh phẩm thường quy trong
các xét nghiệm chẩn đoán lao phổi. Tuy nhiên
việc thu thập mẫu đàm thường gặp phải một số
thử thách như bệnh nhân không thể ho, khạc
được mẫu đàm hoặc chỉ thu được mẫu đàm kém
chất lượng [4], [5]. Nhiều nghiên cứu trước đây
về các mẫu bệnh phẩm như hơi thở, nước bọt,
máu, nước tiểu và phân để xác định vi khuẩn lao
đã được thực hiện nhưng hiệu quả vẫn còn ở
mức hạn chế [1], [5]. Gần đây một số nghiên
cứu về mẫu phết niêm mạc miệng cho thấy với
2.4. Xét nghiệm real-time PCR mẫu phết
niêm mạc miệng (01 mẫu)
Mẫu phết niêm mạc miệng được ly trích acid
đặc điểm dễ lấy, an toàn, ít xâm lấn, chi phí thấp nucleic toàn bộ, sản phẩm ly trích được đưa vào
và dễ dàng đồng bộ trong việc thu thập cũng phản ứng real-time PCR khuếch đại một đoạn
như xử lý mẫu, có tính khả thi để bổ sung hoặc đặc hiệu dài 249bp từ đọan chèn IS6110 hiện
diện với khoảng 16-25 copies trên genome của
Mycobacterium tuberculosis. Các đoạn gen đích
được phát hiện sau mỗi chu kì nhân lên trong
phản ứng bằng đoạn dò có gắn chất phát huỳnh
quang (Taqman probe).
2.5. Các xét nghiệm đàm (03 mẫu)
- Xét nghiệm AFB trực tiếp (2 mẫu): xét
nghiệm được thực hiện bằng phương pháp
nhuộm huỳnh quang và phát hiện AFB dưới kính
hiển vi huỳnh quang.
thay thế mẫu đàm trong chẩn đoán lao phổi [2],
[3], [6]. Để thực hiện bước đầu trong việc kiểm
chứng tính khả thi của mẫu niêm mạc miệng
trong điều kiện thực tế chẩn đoán lao phổi
chúng tôi thực hiện nghiên cứu này với mục tiêu:
Xác định giá trị chẩn đoán của xét nghiệm phát
hiện DNA Mycobacterium tuberculosis trong mẫu
phết niêm mạc miệng của bệnh nhân nghi ngờ
mắc lao phổi bằng kỹ thuật real-time PCR và
phân tích một số yếu tố liên quan có thể gây âm
tính giả mẫu phết niêm mạc miệng.
- Xét nghiệm Xpert MTB/RIF Ultra (1 mẫu):
167
vietnam medical journal n01 - MAY - 2021
xét nghiệm dựa trên phản ứng hemi-nested real- miệng trong chẩn đoán lao phổi
time PCR với đoạn đích để xác định sự có mặt
3.2.1. Tỉ lệ phát hiện chung. Trong tổng
của Mycobacterium tuberculosis là đoạn IS 6110 số 85 trường hợp nghi ngờ mắc lao phổi chúng
và đoạn IS 1081.
tôi xác định được 32 trường hợp (31,8%) dương
2.6. Quản lý và xử lý số liệu. Nhập dữ liệu tính với xét nghiệm real-time PCR phát hiện DNA
trên phần mềm Excel. Xử lý thống kê dữ liệu vi khuẩn lao trong mẫu phết niêm mạc miệng.
bằng phần mềm R (version 3.6.3).
3.2.2. Giá trị độ nhạy, độ đặc hiệu, giá
trị tiên đoán dương và giá trị tiên đoán âm
so với mẫu đàm. Chúng tôi sử dụng kết quả
xét nghiệm Xpert MTB mẫu đàm làm tiêu chuẩn
chẩn đoán và xác định các độ nhạy, độ đặc hiệu,
giá trị tiên đoán dương và giá trị tiên đoán âm
của mẫu phết niêm mạc miệng lần lượt là
74,4%, 100%, 100% và 79,2% (Bảng 1).
Bảng 1. So sánh kết quả xét nghiệm
real-time PCR mẫu phết niêm mạc miệng
và kết quả xét nghiệm Xpert MTB mẫu đàm
(n=85)
III. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU
Trong thời gian từ tháng 2 đến tháng 4 năm
2020 tại Khoa Khám và Điều trị ngoại trú, Bệnh
viện Phạm Ngọc Thạch, Thành phố Hồ Chí Minh,
chúng tôi thu nhận và phân tích 85 trường hợp
trong nghiên cứu này.
3.1. Đặc điểm dân số nghiên cứu. Độ tuổi
trung bình của dân số nghiên cứu là 44,9 tuổi (±
16,4), thấp nhất là 19 và cao nhất là 80. Về
nghề nghiệp, nghề tự do có tỉ lệ cao nhất với
38,8%, kế đến là nhóm nghề công nhân và nông
dân, mỗi nhóm chiếm khoảng 20% (21,2% và
17,6%), nhóm nhân viên, sinh viên và nhóm
nghề khác mỗi nhóm chiếm khoảng 10% còn lại.
Dựa vào kết quả xét nghiệm Xpert MTB mẫu
đàm có 43 bệnh nhân được chẩn đoán xác định
mắc lao phổi, tỉ lệ 50,6% (43/85).
Kết quả Xpert MTB
Dương
Âm tính
tính
(n=42)
(n=43)
Dương tính
(n=32)
Âm tính
(n=53)
Real-time
PCR phết
niêm mạc
miệng
32
0
11
42
3.2. Giá trị phát hiện DNA Mycobacterium
tuberculosis trong mẫu phết niêm mạc
3.2.3. Giá trị của mẫu phết niêm mạc miệng khi bệnh nhân không thể ho khạc đàm tự
nhiên tại thời điểm khám
Bảng 2. So sánh kết quả xét nghiệm mẫu phết niêm mạc miệng và mẫu đàm theo các
phương pháp lấy mẫu đàm
Phết niêm mạc miệng
Xpert MTB (n=85)
(n=85)
Phương pháp lấy mẫu đàm
Dương tính
Âm tính
(n=42)
13
Dương tính
Âm tính
(n=53)
17
(n=43)
14
(n=32)
10
Lấy đàm kích thích (n=27)
Lấy đàm tự nhiên (n=58)
Trong buổi khám (n=36)
Nhận lọ chứa đàm về và nộp sau
(n=22)
29
17
29
19
22
13
36
23
12
10
9
13
Xét các trường hợp không thể lấy được mẫu đến sự âm tính giả của mẫu phết niêm mạc
đàm tại thời điểm khám, có 27 trường hợp được miệng so với xét nghiệm Xpert MTB. Trong
chỉ định phun khí dung để lấy đàm kích thích. 43 bệnh nhân có kết quả Xpert MTB dương tính,
Kết quả có 14 trường hợp dương tính với xét có 11 trường hợp không phát hiện DNA vi khuẩn
nghiệm Xpert MTB mẫu đàm, trong số 14 trường lao trong mẫu niêm mạc miệng (âm tính giả) và
hợp đó mẫu phết niêm mạc miệng cũng đã phát phát hiện được 32 trường hợp còn lại (dương
hiện được 10 trường hợp (71,4%). Bên cạnh đó tính thật). Kết quả đánh giá mối liên quan đến
cũng có 22 trường hợp mang lọ chứa đàm để ho sự âm tính giả của mẫu phết niêm mạc miệng:
khạc tại nhà và nộp lại sau. Kết quả có 12
3.3.1. Mật độ vi khuẩn trong mẫu đàm.
trường hợp dương tính với xét nghiệm mẫu đàm, Sự ảnh hưởng mật độ vi khuẩn trong mẫu đàm
và mẫu phết niêm mạc miệng phát hiện được 9 đến sự âm tính giả của mẫu phết niêm mạc
trường hợp (75%).
miệng được đánh giá thông qua kết quả AFB
3.3. Phân tích một số yếu tố liên quan trực tiếp mẫu đàm, vì ở bệnh nhân có mật độ vi
168
TẠP CHÍ Y h c vi t nam tẬP 502 - th ng 5 - s 1 - 2021
khuẩn thấp thường biểu hiện ở kết quả xét
nghiệm AFB âm tính.
miệng âm miệng dương
tính (n=11) tính (n=32)
Tỷ lệ âm tính giả ở nhóm bệnh nhân có kết
quả AFB âm tính là 87,5% (7/8) và ở nhóm có ít
nhất một mẫu đàm AFB dương tính là 11,4%
(4/35) (Bảng 3), sự khác biệt này có ý nghĩa
thống kê với P<0,001 qua phép kiểm Chi bình phương.
Bảng 3. Phân bố kết quả xét mẫu phết
niêm mạc miệng theo kết quả nhuộm soi
AFB trực tiếp của nhóm bệnh nhân mắc lao.
Nhóm bệnh nhân có kết
Bệnh Có (n=6)
nhân
2
4
đang
điều trị
(n= 37)
đái tháo
Không
9
28
đường
Có (n=14)
Không
(n=29)
8
3
6
Ăn uống
trước khi
lấy mẫu
26
quả Xpert dương tính
IV. BÀN LUẬN
(n=43)
Về đặc điểm dân số học chúng tôi nhận thấy
sự phân bố về độ tuổi và giới tính của dân số
trong nghiên cứu này có sự tương đồng với báo
cáo của WHO năm 2019 về tình hình bệnh lao tại
Việt Nam. Về các đặc điểm lâm sàng trong dân
số nghiên cứu của chúng tôi tương đồng với một
số nghiên cứu tương tự [2], [8].
Mẫu phết
niêm mạc
miệng âm
tính (n=11)
Mẫu phết niêm
mạc miệng
dương tính
(n=32)
AFB âm tính
(n=8)
AFB dương
tính (n=35)
7
4
1
31
Trong nghiên cứu của chúng tôi độ nhạy của
xét nghiệm phát hiện DNA trong mẫu niêm mạc
miệng khi so sánh với kết quả xét nghiệm Xpert
MTB mẫu đàm là 74,4% thấp hơn so với nghiên
cứu của Wood và cs (2015) [6] cho độ nhạy đạt
90% trên nhóm 20 bệnh nhân (18/20) đã được
chẩn đoán xác định với xét nghiệm Xpert MTB
mẫu đàm dương tính. Về mặt phương pháp,
chúng tôi lấy 1 mẫu phết niêm mạc miệng duy
nhất tại thời điểm bệnh nhân nghi lao đến khám,
tác giả trên thu thập 3 mẫu phết niêm mạc
miệng ở các ngày khác nhau, khi bất kì mẫu
phết niêm mạc miệng dương tính thì được xác
định là dương tính. Nếu chỉ xét 1 mẫu phết niêm
mạc miệng đầu tiên của mỗi bệnh nhân trong
nghiên cứu trên thì tỉ lệ phát hiện của nghiên
cứu trên là khoảng 60% (12/20). Về mặt kỹ
thuật xét nghiệm, tiêu chuẩn so sánh của chúng
tôi là xét nghiệm Xpert MTB thế hệ mới nhất
(Xpert MTB/RIF Ultra) với độ nhạy được cải thiện
đáng kể và được áp dụng cho nhóm bệnh nhân
nghi ngờ mắc lao phổi so với kỹ thuật Xpert MTB
thế hệ đầu tiên mà tác giả Wood đã sử dụng để
chọn những người có mẫu đàm dương tính và
sau đó lấy mẫu phết niêm mạc miệng cho
nghiên cứu, có thể do những sự khác biệt này
nên trong nghiên cứu của chúng tôi bao gồm cả
những bệnh nhân có mật độ vi khuẩn thấp và
rất thấp.
3.3.2. Yếu tố ăn uống trước khi lấy mẫu
và bệnh lý đái tháo đường
Trong nghiên cứu này chúng tôi loại ra những
bệnh nhân đã ăn uống, vệ sinh răng miệng trong
vòng 30 phút trước khi lấy mẫu, ở những bệnh
nhân được thu dung vào nghiên cứu chúng tôi
ghi nhận thời gian ăn uống cách lúc lấy mẫu dao
động từ 45 phút cho đến 180 phút. Ngoài ra yếu
tố đang điều trị bệnh lý đái tháo đường (làm
thay đổi niêm mạc miệng, giảm tiết nước bọt
khiến niêm mạc miệng nhạy cảm hơn [7]) cũng
được ghi nhận (Bảng 4).
Tỷ lệ âm tính giả của mẫu phết niêm mạc
miệng ở nhóm bệnh nhân có ăn uống trước khi
lấy mẫu là 57,1% (8/14) và ở nhóm bệnh nhân
không ăn uống trước khi lấy mẫu là 10,3%
(3/29), sự khác biệt này có ý nghĩa thống kê với
P=0,003. Tỷ lệ này ở nhóm bệnh nhân đang
điều trị đái tháo đường và nhóm không điều trị
đái tháo đường lần lượt là 33,3% (2/6) và
24,3% (9/37), sự khác biệt này không có ý nghĩa
thống kê với P xấp xỉ 1,000 qua phép kiểm Chi
bình phương.
Bảng 4. Đánh giá sự ảnh hưởng của yếu
tố ăn, uống trước khi lấy mẫu và đang điều
trị đái tháo đường đến kết quả âm tính giả
của mẫu phết niêm mạc miệng.
Nhóm bệnh nhân có kết
quả Xpert dương tính
Luabeya và cs (2020) [2] với thiết kế nghiên
cứu cắt ngang tương tự nghiên cứu của chúng
tôi trên đối tượng bệnh nhân nghi ngờ mắc lao
phổi. Mẫu phết niêm mạc miệng cũng được thực
hiện xét nghiệm real-time PCR sử dụng cặp mồi
(n=43)
Mẫu phết
niêm mạc
Mẫu phết
niêm mạc
169
vietnam medical journal n01 - MAY - 2021
đặc hiệu cho đoạn chèn IS 6110 của vi khuẩn mẫu phết niêm mạc miệng. Chuẩn hóa khâu lấy
lao. Kết quả độ nhạy của mẫu niêm mạc miệng mẫu và lấy mẫu sớm để tránh các hoạt động
khi so sánh với kết quả xét nghiệm Xpert MTB là như ăn uống, vệ sinh răng miệng làm giảm mật
79,6% (39/49) cho mẫu ngày 1 và 85,7% độ vi khuẩn.
(42/49) cho ngày 2, khi sử dụng kết hợp cả 2
Nghiên cứu của chúng tôi còn một số hạn chế
mẫu thì độ nhạy tăng lên đến 91,8% (45/49). như số lượng mẫu chưa lớn và chỉ thực hiện trên
Đặc biệt, trong nghiên cứu trên tác giả hướng đối tượng là người trưởng thành trong khi việc
dẫn bệnh nhân không ăn uống trước khi lấy mẫu nghiên cứu trên một số đối tượng gặp khó khăn
ở ngày thứ 2, điều đó có thể đã làm tăng độ trong việc ho, khạc đàm hoặc có mật độ vi
nhạy trong nghiên cứu. Như vậy nếu xác định khuẩn thấp như trẻ nhỏ, người già suy kiệt,
trên 1 mẫu ngày đầu tiên của tác giả Luabeya và người nhiễm HIV/AIDS cũng thực sự cần thiết.
cs thì kết quả nghiên cứu của chúng tôi cũng có
sự tương đồng với tác giả.
V. KẾT LUẬN
Kết quả nghiên cứu cho thấy có thể phát hiện
Tác giả Wood [6] cũng đánh giá về sự âm
DNA vi khuẩn lao trong mẫu phết niêm mạc
tính giả của mẫu phết niêm mạc miệng, tác giả
miệng bằng kỹ thuật sinh học phân tử và cho
nhận thấy có liên quan đến việc đang mắc và
thấy tiềm năng để có thể sử dụng như một mẫu
điều trị đái tháo đường (cả 2 trường hợp âm tính
bệnh phẩm mới để bổ sung cho mẫu bệnh phẩm
giả của mẫu phết niêm mạc miệng đều đang
đàm để tăng tỷ lệ xác định bằng chứng vi khuẩn
học một cách không xâm lấn và kịp thời.
mắc và điều trị đái tháo đường) (P=0,013), yếu
tố mật độ vi khuẩn thấp cũng được đánh giá
thông qua so sánh tỷ lệ âm tính giả ở nhóm có
TÀI LIỆU THAM KHẢO
kết quả nhuộm AFB trực tiếp dương tính và âm
tính (đại diện cho nhóm có mật độ vi khuẩn
thấp), tác giả ghi nhận không có mối tương quan
giữa sự âm tính của xét nghiệm AFB trực tiếp và
sự âm tính giả của mẫu phết niêm mạc miệng
(P=0,25). Trong nghiên cứu của chúng tôi ghi
nhận không có sự liên quan đến tình trạng đang
mắc và điều trị đái tháo đường với sự âm tính
giả của mẫu phết niêm mạc miệng. Đối với ảnh
hưởng của mật độ vi khuẩn chúng tôi ghi nhận
có mối tương quan giữa mật độ vi khuẩn thấp và
sự âm tính giả, điều này không tương đồng với
tác giả Wood nhưng lại phù hợp với kết quả
nghiên cứu của Lima và cs (2020) [8] khi cho
thấy độ nhạy của xét nghiệm phát hiện vi khuẩn
lao trong mẫu phết niêm mạc miệng giảm dần
theo mật độ của vi khuẩn trong mẫu đàm tương
ứng. Trong nghiên cứu của chúng tôi cũng ghi
nhận sự ảnh hưởng của yếu tố bệnh nhân có ăn
uống trước khi lấy mẫu phết niêm mạc miệng
đến sự âm tính giả, điều này cũng phù hợp với
giả thuyết về sự giảm độ nhạy khi mật độ vi
khuẩn giảm xuống do việc ăn uống trước đó
cũng có thể dẫn đến giảm mật độ vi khuẩn ở
niêm mạc miệng của bệnh nhân.
1. Oberhelman. Richard A, Soto-Castellares.
Giselle, Gilman. Robert H, et al. (2010),
"Diagnostic approaches for paediatric tuberculosis
by use of different specimen types, culture
methods, and PCR: a prospective case-control
study", The Lancet infectious diseases, 10 (9),
612-620.
2. Luabeya. Angelique K, Wood. Rachel C,
Shenje. Justin, et al. (2019), "Noninvasive
Detection of Tuberculosis by Oral Swab Analysis",
Journal of clinical microbiology, 57 (3), e01847-01818.
3. Nicol. Mark P, Wood. Rachel C, Workman.
Lesley, et al. (2019), "Microbiological diagnosis
of pulmonary tuberculosis in children by oral swab
polymerase chain reaction", Sci Rep, 9 (1), 1-5.
4. Mateus Sakundarno, Nurjazuli Nurjazuli,
Sutopo Patria Jati, et al. (2009), "Insufficient
quality of sputum submitted for tuberculosis
diagnosis and associated factors, in Klaten district,
Indonesia", 9 (1), 16.
5. Shubhada Shenai, Danielle Amisano,
Katharina Ronacher, et al. (2013), "Exploring
alternative biomaterials for diagnosis of pulmonary
tuberculosis in HIV-negative patients by use of the
GeneXpert MTB/RIF assay", 51 (12), 4161-4166.
6. R. C. Wood, A. K. Luabeya, K. M. Weigel, et al.
(2015), "Detection of Mycobacterium tuberculosis
DNA on the oral mucosa of tuberculosis patients",
Sci Rep, 5, 8668.
7. Alliny de Souza Bastos, Andressa Rosa Perin
Leite, Rubens Spin-Neto, et al. (2011),
"Diabetes mellitus and oral mucosa alterations:
prevalence and risk factors", 92 (1), 100-105.
8. Lima. Fabiano, Santos. Andrea S, Oliveira.
Roberto D, et al. (2020), "Oral swab testing by
Xpert® MTB/RIF Ultra for mass tuberculosis
screening in prisons", Journal of Clinical
Tuberculosis Other Mycobacterial Diseases, 19,
100148.
Nghiên cứu của chúng tôi cho thấy tính khả
thi của việc phát hiện DNA vi khuẩn lao trong
mẫu phết niêm mạc miệng. Độ nhạy của mẫu
phết niêm mạc miệng trong nghiên cứu này so
với mẫu đàm còn tương đối thấp, tuy nhiên còn
nhiều điểm trong nghiên cứu này có thể cải thiện
thêm khả năng phát hiện vi khuẩn như tăng số
170
5 trang
15/04/2022
3200
Bạn đang xem tài liệu "Phát hiện DNA Mycobacterium Tuberculosis trong mẫu phết niêm mạc miệng với kỹ thuật Real-time PCR trong chẩn đoán lao phổi", để tải tài liệu gốc về máy hãy click vào nút Download ở trên
File đính kèm:
- phat_hien_dna_mycobacterium_tuberculosis_trong_mau_phet_niem.pdf
