Hoạt tính kháng khuẩn của chiết xuất thảo dược lên vi khuẩn Vibrio parahaemolyticus gây bệnh hoại tử gan tụy cấp tính trên tôm thẻ chân trắng (Litopenaeus vannamie) trong điều kiện in vitro
DOI: 10.35382/18594816.1.38.2020.559
T Ạ P CHÍ KHOA HỌC TRƯỜNG ĐẠI HỌC TRÀ VINH, SỐ 38, THÁNG 6 N Ă M 2020
HOẠT TÍNH KHÁNG KHUẨN CỦA
CHIẾT XUẤT THẢO DƯỢC LÊN VI KHUẨN
Vibrio parahaemolyticus G Â Y BỆNH HOẠI TỬ G A N TỤY
C Ấ P TÍNH TRÊN TÔM THẺ CHÂN TRẮNG
(Litopenaeus vannamie) TRONG ĐIỀU KIỆN IN VITRO
Nguyễn Chí Nguyện1, Nguyễn Thị Hồng Nhi2
ANTIBACTERIAL ACTIVITY OF HERBAL EXTRACTS AGAINST
Vibrio parahaemolyticus CAUSING ACUTE HEPATOPANCREATIC
NECROSIS DISEASE (AHPND) IN WHITELEG SHRIMP
(Litopenaeus vannamei) IN VITRO
Nguyen Chi Nguyen1, Nguyen Thi Hong Nhi2
Tóm tắt – Nghiên cứu hoạt tính kháng
khuẩn của chiết xuất lá trứng cá, hành tây,
thù lù bằng ethanol 90% và 70% đối với
vi khuẩn Vibrio parahaemolyticus gây bệnh
hoại tử gan tụy cấp tính trên tôm thẻ chân
trắng (Litopenaeus vannamei) được thực hiện
tại Khoa Nông nghiệp – Thủy sản, Trường
Đại học Trà Vinh. Kết quả cho thấy, vòng
kháng khuẩn của chiết xuất lá trứng cá
ethanol 70% lớn nhất là 18,00 ± 0,00 mm,
chiết xuất lá trứng cá bằng ethanol 90% là
17,33 ± 0,58 mm và chiết xuất dịch tươi
là 13,00 ± 0,00 mm. Nồng độ ức chế tối
thiểu (MIC) của chiết xuất lá trứng cá bằng
ethanol 70% và 90% lần lượt là 5.120 mg/L,
10.240 mg/L. Giá trị MIC của chiết xuất
hành tây bằng ethanol 70% và 90% là 40.960
mg/L, chiết xuất thù là bằng ethanol 70% và
90% là 81.920 mg/L. Kết quả nghiên cứu cho
thấy hoạt tính kháng khuẩn của chiết xuất lá
trứng cá mạnh nhất và thấp nhất là chiết xuất
của thù lù.
Từ khóa: hành tây, hoạt tính kháng
khuẩn, cây thù lù, cây trứng cá, Vibrio
parahaemolyticus.
Abstract – The antibacterial activity of
herbal extracts to Vibrio parahaemolyticus
causing acute hepatopancreatic necrosis dis-
ease in whiteleg shrimp (Litopenaeus van-
namei) was studied and carried out in the
School of Agriculture and Aquaculture, Tra
Vinh University. The results showed that
the inhibition zone of Muntingia calabura
leaf extract with ethanol 70% was 18.00
± 0.00mm, Muntingia calabura leaf extract
with ethanol 90% was 17.33 ± 0.58 mm
and Muntingia calabura fresh leaf extract
was 13.00 ± 0.00 mm. Minimum inhibitory
concentration (MIC) of Muntingia calabura
leaf extract with ethanol 70% and 90% were
5.120 mg/L, 10.240 mg/L. MIC value of Al-
1Sinh viên, Khoa Nông nghiệp - Thủy sản, Trường Đại
học T rà Vinh
2Khoa Nông nghiệp - Thủy sản, Trường Đại học T rà Vinh
Ngày nhận bài: 21/10/2019; Ngày nhận k ế t quả bình
duyệt: 17/3/2020; Ngày chấp nhận đăng: 25/6/2020
Email: [email protected]
1Student, School of Agriculture and Aquaculture,
T ra Vinh University.
2School
of
Agriculture
and
Aquaculture,
T ra Vinh University.
Received date: 21st October 2019; Revised date: 17th
March 2020; Accepted date: 25th June 2020
82
TẠP CHÍ KHOA HỌC TRƯỜNG ĐẠI HỌC TRÀ VINH, SỐ 38, THÁNG 6 NĂM 2020
NÔNG NGHIỆP - THỦY SẢN
lium cepa extract with ethanol 70% and 90%
were 40.960 mg/L, Physalis angulata extract
with ethanol 70% and 90% were 81.920
mg/L. The results showed that the antimi-
crobial activity was highest in the Muntingia
calabura leaf extract and lowest in Physalis
angulata extract.
biệt là giảm khả năng kháng thuốc của vi
khuẩn [8], [9].
Bên cạnh đó, nhiều báo cáo đã ghi nhận
hiệu quả của các loại thảo mộc như là chất
khai vị và thúc đẩy tăng trưởng trong các loài
thủy sản, giúp nông dân giảm chi phí đầu tư,
tăng lợi nhuận [10].
Keywords: Allium cepa, antibacterial ac-
tivity, Muntingia calabura, Physalis angu-
lata, Vibrio parahaemolyticus.
Thù lù, hành tây và trứng cá là những cây
thuốc có giá thành rẻ và phổ biến. Chúng
chứa nhiều hợp chất quý như flavonoid,
steroid, saponin, tannin và triterpen [11].
Tuy nhiên, chúng ta vẫn chưa có nghiên
cứu nào xác định khả năng kháng khuẩn V.
parahaemolyticus gây bệnh hoại tử gan tụy
cấp tính trên tôm thẻ chân trắng của các
thảo dược trên. Vì vậy, nghiên cứu ‘Hoạt tính
kháng khuẩn của chiết xuất thảo dược lên
vi khuẩn Vibrio parahaemolyticus gây bệnh
hoại tử gan tụy cấp tính trên tôm thẻ chân
trắng (Litopenaeus vannamie) trong điều kiện
in vitro’ đã được thực hiện.
I. ĐẶT VẤN ĐỀ
Tôm thẻ chân trắng là đối tượng có giá trị
kinh tế cao, thị trường tiêu thụ rộng [1]. Ở
Việt Nam, diện tích nuôi tôm thẻ chân trắng
trên cả nước tính đến tháng 10/2019 là 99.740
ha. Sản lượng thu hoạch tôm thẻ chân trắng
là 386.701 tấn [2].
Bệnh hoại tử gan tụy cấp tính được xem
là bệnh nguy hiểm và gây ra nhiều thiệt hại
đến sản lượng tôm nuôi trong những năm gần
đây ở các nước Đông Nam Á và Mexico [3],
[4].
II. TỔNG QUAN NGHIÊN CỨU
Riêng tại tỉnh Trà Vinh, tính đến tháng
3/2019, tổng sản lượng tôm thẻ chân trắng
đạt 4.332 tấn, tăng 600 tấn so với cùng kì
năm 2018. Tổng hộ nuôi tôm thẻ chân trắng
bị thiệt hại là 773 hộ và diện tích tôm thẻ
chân trắng bị thiệt hại là 258 ha [5]. Nguyên
nhân gây bệnh hoại tử gan tụy cấp tính là do
vi khuẩn V. parahaemolyticus gây ra [6]. Sự
lạm dụng thuốc kháng sinh trong nuôi trồng
thủy sản đã gây ảnh hưởng xấu tới sức khỏe
động vật nuôi, môi trường sinh thái và đặc
biệt là tạo ra các chủng vi khuẩn kháng lại
thuốc kháng sinh, làm giảm hiệu quả điều trị
bệnh và tăng nguy cơ nhiễm khuẩn có khả
năng kháng thuốc cho con người, động vật
và tồn dư trong thịt động vật thủy sản [7].
Hiện nay, việc nghiên cứu hoạt chất kháng
khuẩn có nguồn gốc thảo dược đang được
quan tâm nhằm tạo ra các sản phẩm sử
dụng trong phòng trị bệnh thân thiện với môi
trường, đảm bảo an toàn thực phẩm, hạn chế
việc lạm dụng các loại hóa chất, kháng sinh
cấm sử dụng trong nuôi trồng thủy sản, đặc
Nguyễn Công Tráng và cộng sự [12] đã
nghiên cứu xác định khả năng kháng V.
parahaemolyticus của dịch trích lá, vỏ và hạt
cây trâm bầu trong điều kiện in vitro. Nghiên
cứu cho thấy dịch trích cây trâm bầu kháng V.
parahaemolyticus mạnh với đường kính vòng
kháng khuẩn trung bình 13,19 mm. Trong đó,
dịch trích hạt cho tính kháng mạnh hơn dịch
trích từ lá và vỏ với đường kính vòng kháng
khuẩn lần lượt là 16,29 mm, 11,84 mm và
11,44 mm. Kết quả thử nghiệm nồng độ ức
chế tối thiểu MIC của dịch trích hạt trâm bầu
đối với V. parahaemolyticus là 7,5 µL/mL.
Hồng Mộng Huyền và cộng sự [13] đã
nghiên cứu khảo sát hoạt tính kháng khuẩn
của bảy loại chất chiết thảo dược thầu dầu,
lưỡi rắn, mật gấu, chùm ngây, lược vàng,
ô rô và sài đất. Hoạt tính kháng khuẩn,
nồng độ ức chế tối thiểu (MIC), nồng độ
diệt khuẩn tối thiểu (MBC) của bảy loại cao
chiết thảo dược được sàng lọc trên hai chủng
vi khuẩn V. harveyi và V. parahaemolyticus.
Kết quả ghi nhận hoạt tính kháng khuẩn V.
83
TẠP CHÍ KHOA HỌC TRƯỜNG ĐẠI HỌC TRÀ VINH, SỐ 38, THÁNG 6 NĂM 2020
NÔNG NGHIỆP - THỦY SẢN
parahaemolyticus như sau: thầu dầu có vòng
vô khuẩn là 17,5 ± 0,7 mm, lưỡi rắn có vòng Sinh học Khoa Thương tại Trung tâm Phân
vô khuẩn là 7,0 ± 0,0 mm, mật gấu có vòng tích – Kiểm nghiệm TVU, Trường Đại học
bằng bộ kit của Công ty TNHH Công nghệ
vô khuẩn là 9,5 ± 0,7 mm, chùm ngây có Trà Vinh.
vòng vô khuẩn là 9,0 ± 0,0 mm, lược vàng
3) Phương pháp chiết xuất thảo dược:
có vòng vô khuẩn là 7,5 ± 0,7 mm, ô rô có Việc chiết xuất thảo dược dựa vào phương
vòng vô khuẩn là 9,0 ± 1,4 mm và sài đất
có vòng vô khuẩn là 8,0 ± 1,4 mm.
Tuy nhiên, chúng ta cần có nhiều công
trình nghiên cứu xác định khả năng ức chế
vi khuẩn V. parahaemolyticus gây bệnh hoại
tử gan tụy cấp tính trên tôm thẻ chân trắng
của thảo dược. Từ đó, chúng ta tìm ra loài
thảo dược có khả năng kháng khuẩn V. para-
haemolyticus tốt nhất và thay thế thuốc kháng
sinh.
pháp của Nguyễn Văn Đàn và cộng sự [16].
Chiết xuất thảo dược bằng ethanol: Thảo
dược đem rửa sạch và phơi khô (to ≤ 50oC).
Tiếp theo, thảo dược được xay nhuyễn và
ngâm ethanol 90%, 70% (tỉ lệ ethanol và
thảo dược là 4:1). Sau bảy ngày lọc qua giấy
lọc, chúng tôi thu được cao chiết. Sau đó,
cao chiết được đem phơi đến khi khô (to ≤
50oC). Cao chiết được bảo quản nơi thoáng
mát 4oC.
Chiết xuất dịch tươi thảo dược: Thảo dược
tươi được rửa sạch và để ráo nước. Tiếp theo,
thảo dược được xay nhuyễn với nước 1,5%
NaCl (tỉ lệ thảo dược và nước 1,5% NaCl là
1:1), sau đó, lọc lấy nước cốt. Dịch tươi được
bảo quản trong tủ mát 4oC không quá 24 giờ.
Hiệu suất (%) chiết xuất thảo dược được
dựa theo tiêu chuẩn Dược điển Việt Nam IV
[17]:
III. PHƯƠNG PHÁP VÀ PHƯƠNG TIỆN
NGHIÊN CỨU
A. Thời gian và địa điểm thí nghiệm
Nghiên cứu được thực hiện từ ngày
01/01/2019 đến ngày 30/07/2019 tại Phòng
Bệnh học Thủy sản, Khoa Nông nghiệp –
Thủy sản, Trường Đại học Trà Vinh.
Hiệu suất (%) = [khối lượng chất chiết xuất
(g) / khối lượng mẫu cao chiết] * 100.
4) Phương pháp xác định khả năng kháng
khuẩn của thảo dược qua khuếch tán trên
giếng thạch: Phục hồi vi khuẩn V. para-
haemolyticus gây bệnh hoại tử gan tụy cấp
tính trong môi trường BHIB có bổ sung 1,5%
NaCl. Mật độ vi khuẩn sẽ được xác định
bằng máy đo quang phổ ở bước sóng 610
nm. Khi mật độ vi khuẩn đạt 108 CFU/mL,
chúng ta lắc đều bình chứa vi khuẩn, dùng
pipet hút 100 µL vi khuẩn nhỏ vào giữa đĩa
thạch môi trường BHIA, dùng que thủy tinh
trải đều. Sau 15 phút tiến hành đục lỗ trên
mặt thạch với đường kính 6 mm/lỗ đục cách
nhau khoảng 20 mm và khoảng cách giữa lỗ
với mép đĩa petri 10-15 mm. Mỗi đĩa petri
(đường kính 100 mm) đục bốn lỗ.
B. Phương pháp bố trí thí nghiệm
1) Phương pháp phân lập vi khuẩn từ
mẫu tôm bệnh: Phân lập vi khuẩn V. para-
haemolyticus dựa vào phương pháp của Pin-
toet et al. [14] và Lê Xuân Phương [15].
Tôm thẻ chân trắng có dấu hiệu bệnh lí,
bệnh hoại tử gan tụy cấp tính được thu từ
ao nuôi tại xã Mỹ Long Nam, huyện Cầu
Ngang, tỉnh Trà Vinh. Các chủng vi khuẩn
được chúng tôi phân lập và định danh theo
phương pháp của Cowan and Steels (Barrow
and Felthham, 1993) kết hợp với việc sử dụng
bộ KIT API 20E (BioMerieux, Pháp). Việc
phân lập và định danh chủng vi khuẩn V.
parahaemolyticus được sử dụng trong nghiên
cứu.
2) Kiểm tra gen độc lực của V. para-
haemolyticus bằng phương pháp Realtime
Chúng ta dùng pipet hút 100 µL chiết xuất
PCR: Vi khuẩn V. parahaemolyticus được dịch tươi thảo dược nhỏ trực tiếp vào giếng
kiểm tra gen độc lực gây bệnh hoại tử gan
tụy cấp tính theo phương pháp realtime PCR
thạch. Thảo dược ethanol 90% và thảo dược
ethanol 70% được chiết xuất, đem pha loãng
84
TẠP CHÍ KHOA HỌC TRƯỜNG ĐẠI HỌC TRÀ VINH, SỐ 38, THÁNG 6 NĂM 2020
NÔNG NGHIỆP - THỦY SẢN
với nước 1,5% NaCl (tỉ lệ thảo dược và nước
1,5% NaCl là 1 : 10). Sau đó, chúng ta hút
100 µL nhỏ vào giếng thạch (mỗi nghiệm
thức lặp lại ba lần), đặt đĩa thạch vào tủ ấm
cá (18,83%). Kết quả hiệu suất chiết xuất lá
trứng cá từ dung môi ethanol cao hơn so với
hiệu suất chiết xuất lá trứng cá từ dung môi
nước (11,928 %) của Puguh et al. [21] Kết
ở điều kiện 37oC. Sau 24 giờ, chúng ta tiến quả hiệu suất chiết xuất thù lù từ dung môi
hành đọc kết quả bằng cách đo đường kính
vòng vô khuẩn [18]-[20].
ethanol thấp hơn so với hiệu suất chiết xuất
thù lù từ dung môi nước (29,44%) của Aina
et al. [22]. Kết quả hiệu suất chiết xuất hành
tây từ dung môi ethanol cao hơn so với hiệu
suất chiết xuất hành tây từ dung môi ethyl
acetate (1,64%) của Đỗ Thị Thanh Trung và
cộng sự [23]. Phương pháp chiết xuất và dung
môi khác nhau cho hiệu suất chiết xuất thu
được khác nhau. Nguyên nhân là do các điều
kiện nhiệt độ, thời gian sấy mẫu, mẫu thu
hái những vùng khác nhau, thời gian thu hái
khác nhau, loại dung môi. Các điều kiện này
ảnh hưởng đến quá trình chiết xuất, mức độ
phá vỡ mô tế bào và giải phóng các chất có
trong thảo dược [24].
5) Phương pháp thử nghiệm nồng độ ức
chế tối thiểu (MIC): Thảo dược được pha
loãng với 1,5% NaCl theo các nồng độ
5 mg/L, 10 mg/L, 20 mg/L, 40 mg/L, 80
mg/L.. . 163.840 mg/L. Vi khuẩn V. para-
haemolyticus được nuôi tăng sinh trong môi
trường BHIB có bổ sung 1,5% NaCL. Mật
độ vi khuẩn dung trong thí nghiệm là 108
CFU/ mL, thí nghiệm lặp lại ba lần. Sau 24
giờ, chúng ta đọc và ghi nhận kết quả [16].
C. Phương pháp xử lí số liệu
Các số liệu được xử lí thống kê sinh học
bằng phần mềm Microsoft Excel 2010 và
SPSS 18.
E. Hoạt tính kháng khuẩn của thảo dược đối
với vi khuẩn V. parahaemolyticus gây bệnh
hoại tử gan tụy cấp tính trên tôm
D. Kết quả chiết xuất thảo dược
Bảng 1: Kết quả hiệu suất chiết xuất ethanol
70% và ethanol 90% của thảo dược
Khối lượng
khô (g)
Khối lượng
cao chiết (g)
Hiệu
Loại dịch chiết
suất (%)
Lá trứng cá
Ethanal 70%
Ethanal 90%
Hành tây
200
200
38,24
37,66
19,12
18,83
Hình 1: Khả năng ức chế vi khuẩn của hành
tây
(Ghi chú: (1) thảo dược chiết xuất bằng
ethanol 90%; (2) thảo dược chiết xuất bằng
ethanol 70%; (3) dịch tươi: (4) đối chứng (-):
1,5% NaCl)
Ethanal 70%
Ethanal 90%
Thù lù
200
200
87,89
66,86
43,94
33,43
Ethanal 70%
Ethanal 90%
200
200
50,85
46,82
25,42
23,41
(Nguồn: Tác giả tổng hợp)
Kết quả thí nghiệm ở Bảng 2 cho thấy cao
chiết lá trứng cá có đường kính kháng khuẩn
V. parahaemolyticus lớn hơn hành tây và thù
lù, khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0,05).
Chiết xuất lá trứng cá bằng ethanol 70%
cho kết quả cao nhất với đường kính kháng
Hiệu suất chiết xuất từ ethanol 70% cao
nhất là cao chiết hành tây (43,94%), thấp nhất
là cao chiết lá trứng cá (19,12%). Đối với
chiết xuất từ ethanol 90%, hiệu suất cao nhất
ở hành tây (33,43%) và thấp nhất ở lá trứng
85
TẠP CHÍ KHOA HỌC TRƯỜNG ĐẠI HỌC TRÀ VINH, SỐ 38, THÁNG 6 NĂM 2020
NÔNG NGHIỆP - THỦY SẢN
Bảng 2: Khả năng kháng khuẩn V. para-
haemolyticus của các loại chiết xuất từ lá
trứng cá, hành tây và thù lù
Đường kính vòng vô khuẩn
Loại thảo dược
(mm)
Trứng cá
Hình 3: Khả năng ức chế vi khuẩn của lá
trứng cá
(Ghi chú: (1) thảo dược chiết xuất bằng
ethanol 90%; (2) thảo dược chiết xuất bằng
ethanol 70%; (3) dịch tươi: (4) đối chứng (-):
1,5% NaCl)
Ethanol 70%
Ethanol 90%
Dịch tươi
18,00 ± 0,00c
17,33 ± 0,58c
13,00 ± 0,00b
Hành tây
Ethanol 70%
Ethanol 90%
Dịch tươi
0 ± 0a
0 ± 0a
0 ± 0a
Thù lù
Ethanol 70%
Ethanol 90%
Dịch tươi
0 ± 0a
0 ± 0a
0 ± 0a
0
khuẩn lớn nhất đạt 18,00 ± 0,00 mm, tiếp
theo lần lượt là chiết xuất lá trứng cá ethanol
90% với vòng vô khuẩn là 17,33 ± 0,58 mm
và dịch tươi là 13,00 ± 0,00 mm. Đường kính
vòng kháng khuẩn của chiết xuất lá trứng cá
ethanol 70% khác biệt có ý nghĩa thống kê
so với dịch tươi nhưng khác biệt không có
ý nghĩa thống kê với chiết xuất lá trứng cá
ethanol 90% (p < 0,05).
Đối chứng (-): NaCl 1.5%
P
0
(Nguồn: Tác giả tổng hợp)
(Ghi chú: Các giá trị trong bảng là trung bình và
độ lệch chuẩn, các giá trị trong cùng một cột có
các kí tự khác nhau thì khác biệt có ý nghĩa
thống kê (p < 0,005))
Khả năng kháng khuẩn V. parahaemolyti-
cus của chiết xuất lá trứng cá ethanol 70%
và ethanol 90% có đường kính kháng khuẩn
lớn hơn so với nghiên cứu của Hồng Mộng
Huyền và cộng sự [13] đối với bảy loại chiết
xuất thảo dược: thầu dầu, lưỡi rắn, mật gấu,
chùm ngây, lược vàng, ô rô và sài đất, vòng
kháng khuẩn lần lượt như sau: 17,5 ± 0,7
mm, 7,0 ± 0,0 mm, 9,5 ± 0,7 mm 9,0 ± 0,0
mm, 7,5 ± 0,7 mm, 9,0 ± 1,4 mm và 8,0 ±
1,4 mm.
Lá trứng cá chứa hợp chất flavonoid, tanin,
saponin. Theo Cushine et al. [25], hầu hết các
hợp chất flavonoid có tác dụng kháng khuẩn
do nó kìm hãm và ngăn sự phân chia của vi
khuẩn, ức chế enzym transpeptid, ngăn quá
trình tổng hợp mucopeptid (yếu tố tạo nên
sự bền vững thành vi khuẩn), khi hợp chất
flavonoid gắn lên màng vi khuẩn làm thay
đổi tính thấm của màng, ức chế quá trình
tổng hợp acid nucleic và RNA của vi khuẩn
Hình 2: Khả năng ức chế vi khuẩn của
thù lù
(Ghi chú: (1) thảo dược chiết xuất bằng
ethanol 90%; (2) thảo dược chiết xuất bằng
ethanol 70%; (3) dịch tươi: (4) đối chứng (-):
1,5% NaCl)
86
TẠP CHÍ KHOA HỌC TRƯỜNG ĐẠI HỌC TRÀ VINH, SỐ 38, THÁNG 6 NĂM 2020
NÔNG NGHIỆP - THỦY SẢN
và ức chế sự hoạt động của hyaluronidase
(enzym giúp cho vi khuẩn tấn công sang các
tế bào lân cận). Bên cạnh đó, các vòng carbon
sáu cạnh có gắn các nhóm OH cũng gây ảnh
hưởng đến thành tế bào vi khuẩn. Các nhóm
hợp chất này sẽ xuyên qua thành tế bào vi
khuẩn sau đó bám chặt vào những cấu trúc
ở kích thước phân tử trong tế bào vi sinh vật
như protein và glycoprotein, điều này làm rối
loạn quá trình sinh tổng hợp của các vi sinh
vật đó gây chết vi sinh vật [26].
xanh đối với vi khuẩn V. parahaemoliticus
giá trị MIC bằng 312 mg/mL [28].
IV. KẾT LUẬN VÀ KHUYẾN NGHỊ
Chiết xuất lá trứng cá ethanol 70% có
đường kính vòng kháng khuẩn lớn nhất đạt
18,00 ± 0,00 mm. Tiếp theo, chiết xuất lá
trứng cá ethanol 90% là 17,33 ± 0,58 mm
và chiết xuất dịch tươi là 13,00 ± 0,00 mm.
Giá trị MIC của chiết xuất lá trứng cá
ethanol 90%, chiết xuất lá trứng cá ethanol
70% lần lượt là 5.120 mg/L, 10.240 mg/L.
Chiết xuất hành tây bằng ethanol 90%, 70%
là 40.960 mg/L. Chiết xuất thù lù ethanol
90%, 70% là 81.920 mg/L.
Thí nghiệm nghiên cứu thảo dược kháng
V. parahaemolyticus trong điều kiện in vitro.
Do đó, chúng ta cần nghiên cứu gây cảm
nhiễm và thăm dò hiệu quả của chiết xuất lá
trứng cá kháng khuẩn V. parahaemolyticus
gây bệnh hoại tử gan tụy cấp tính trên tôm
thẻ chân trắng; xác định liều lượng thảo dược
hợp lí đưa vào thức ăn trong quá trình phòng
trị bệnh trong môi trường thí nghiệm và ngoài
thực địa.
F. Nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) của
chiết xuất thảo dược lên vi khuẩn V. para-
haemolyticus gây bệnh bệnh hoại tử gan tụy
cấp tính trên tôm
TÀI LIỆU THAM KHẢO
Hình 4: Kết quả nồng độ ức chế tối thiểu
(MIC) của chiết xuất thảo dược
[1] VFS. Báo cáo ngành Thủy sản. Phòng Nghiên cứu
phân tích (Vietfirst Securitiest). Công ty Cổ phần
chứng khoán Nhất Việt. 2018.
[2] Bộ Nông nghiệp và Phát triển nông thôn. Sản xuất
thủy sản 10 tháng đầu năm tăng 5,5%. Viện Kinh tế
và Quy hoạch thủy sản. 2019.
Kết quả thí nghiệm với chiết xuất ethanol
70% giá trị MIC thấp nhất ở chiết xuất lá
trứng cá (5.120 mg/L) và cao nhất là chiết
xuất thù lù (81.920 mg/L). Chiết xuất ethanol
90% giá trị MIC thấp nhất ở chiết xuất lá
trứng cá (10.240 mg/L) và cao nhất là chiết
xuất thù lù (81.920 mg/L). Khả năng kháng
khuẩn V. parahaemolyticus của chiết xuất lá
trứng cá cao hơn so với nghiên cứu của Hồng
Mộng Huyền và cộng sự [13], nồng độ MIC
của cây thầu dầu là 2,5 mg/mL. Ngoài ra,
nghiên cứu cây chó đẻ thân xanh trên vi
khuẩn V. parahaemolyticus gây bệnh hoại tử
gan tụy cấp tính cho thấy: kết quả MIC là 125
mg/mL [27]. Cao chiết của cây chó đẻ thân
[3] Eduardo M. Leano, Mohan C.V., Early Mortality
Syndrome (EMS)/ Acute Hepatopancreatic Necrosis
Syndrome (AHPNS): An emrging threat in the Asian
shrimp industry NACA, Bangkok, ThaiLand. FAO
Fisheries and Aquaculture Report. 2012;1053:54.
[4] Panakorn S. Opinion article: more on early mortality
syndrome in the shrimp. Aquaculture Asia Pacific.
2012;8(1): 8-10.
[5] Cục Thống kê Trà Vinh. Tình hình kinh tế - xã hội
tỉnh Trà Vinh quý I năm 2019. 2019.
[6] Tran L, Nunan L, Redman R M, Mohney L L, Pantoja
C. R, Fitzsimmons K, Lightner D V. Determination of
the infectious nature of the agent of acute hepatopan-
creatic necrosis syndrome affecting penaeid shrimp.
Dis. Aquat. 2013.
[7] Brown J. Antibiotics: their use and abuse in aquacul-
ture. World Aquac. 1989;20(2):34 - 43.
87
TẠP CHÍ KHOA HỌC TRƯỜNG ĐẠI HỌC TRÀ VINH, SỐ 38, THÁNG 6 NĂM 2020
NÔNG NGHIỆP - THỦY SẢN
[8] Cos P, Vlietinck A.J., Berghe D.V., Maes L. Anti-
infective potential of natural products: How to de-
velop a stronger in vitro ‘proof of concept’. Journal
of Ethnopharmacology. 2006;106(3):290 – 302.
[9] Mahesh B., Satish S. Antimicrobial activity of some
important medicinal plant against plant and human
pathogens. World Journal of Agricultural Sciences.
2008;4:839-843.
[10] Trị Thủy. Các nghiên cứu thảo mộc trong nuôi
trồng thủy sản. Truy cập từ: https://tepbac.com/tin-
tuc/full/Cac-nghien-cuu-thao-moc-trong-nuoi-trong-
thuy-san-22402.html [Ngày truy cập: 25/03/2020].
[11] Su Y. C., Liu C. Vibrio parahaemolyticus: a con-
cern of seafood safety. Food Microbiology. 2007; 24,
549e558. 75.
[21] Puguh Surijowar, Sarwiyono, Imam Thohari, Aswah
Ridhowi. Quantitative and qualitative phytochemicals
analysis of Muntingia calabura. Ethnopharm. Ter-
nak Tropikat Journal of Tropical Animal Production.
2014;15(2):7-14.
[22] S.A. Aina, A.D. Banjo, O.A. Lawal, K. Jonathan. Ef-
ficacy of Some Plant Extracts on Anopheles gambiae
Mosquito Larvae. Academic Journal of Entomology
2. 2009;(1):31-35.
[23] Đỗ Thị Thanh Trung, Phạm Thị Vui, Nguyễn Huyền
Trang, Phạm Vinh Hoa, Nguyễn Thị Thanh Thi, Phạm
Thị Lương Hằng, Phạm Bảo Yên. Đánh giá khả năng
ức chế vi khuẩn Helicobacter pylori của một số dịch
chiết thảo dược Việt Nam. Tạp chí Khoa học Công
nghệ Việt Nam. 2018;60(7):23-27.
[24] Lê Phượng Hiệp. Khảo sát khả năng ức chế vi khuẩn
gây bệnh mụn trứng cá Propionibacterium acnes của
cao chiết từ cây Trứng cá (Muntingia calabura L)
[Khóa luận tốt nghiệp]. Trường Đại học Tây Đô;
2017.
[12] Nguyễn Công Tráng, Ngô Thị Kim Cúc, Phan Ngọc
Thịnh. Khả năng kháng Vibrio parahaemolyticus của
dịch trích cây trâm bầu (Combretum quadrangulare)
trong điều kiện in vitro. Tạp chí Khoa học Trường
Đại học An Giang. 2018;19(1):1-6.
[25] Cushnie, Andrew. Antimicrobial activity of flavonoid.
International Journal of Antimicrobial Agent.
2005;26:343-356.
[26] Immin P., Sinning C. H. and Meyer A. Drugs, their
targets and the nature and number of drug targets.
Drug Discovery. 2006;5:821-834.
[27] Trần Vinh Phương, Hoàng Thị Ngọc Hân, Đặng
Thanh Long, Phạm Thị Hải Yến, Nguyễn Quang
Linh, 2019. Hoạt tính kháng khuẩn của dịch chiết
từ cây chó để thân xanh (Phyllanthus amarus) đối
với vi khuẩn Vibrio parahaemolitycus và Vibrio sp.
gây bệnh hoại tử gan tụy cấp trên tôm chân trắng
(Litopenaeus vannamei). Tạp chí Khoa học Đại học
Huế: Khoa học Tự nhiên. 2019;128(1E):99-106.
[28] Hai Thanh Nguyen, Lua T.Dang, Hanh Thi Nguyen,
Hai Ha Hoang, Ha Thi Ngoc Lai, Ha Thi Thanh
Nguyen. Screening antibacterial effects of Viet-
namese plant extracts against pathogens caused acute
hepatopancreatic necrosis disease in shrimps. Asian
Journal of Pharmaceutical and Clinical Research.
2018;11(5):77.
[13] Hồng Mộng Huyền, Võ Tấn Huy, Trần Thị Tuyết Hoa.
Hoạt tính kháng khuẩn của một số cao chiết thảo dược
kháng vi khuẩn gây bệnh ở tôm nuôi. Tạp chí Khoa
học Trường Đại học Cần Thơ. 2018;Số chuyên đề:
Thủy sản(2):143-150.
[14] Angela Di Pinto, Valentina Terio, Lucia Nov-
ello, Giuseppina Tantillo. Comparison between
thiosulphate-citrate-bile salt sucrose (TCBS) agar
and CHROMagar Vibrio for isolating Vibrio para-
haemolyticus. Food Control xxx. 2010;1 e 4.
[15] Lê Xuân Phương. Thí nghiệm vi sinh vật học. Hà Nội:
Nhà Xuất bản Đại học Quốc gia Hà Nội; 2008.
[16] Nguyễn Văn Đàn, Nguyễn Viết Tựu. Phương pháp
nghiên cứu hóa học cây thuốc. Thành phố Hồ Chí
Minh: Nhà Xuất bản Y học; 1985.
[17] Bộ Y tế. Dược điển Việt Nam IV. Hà Nội: Nhà Xuất
bản Y học Hà Nội; 2009; PL1.1.
[18] Marie B. Coyle. Manual of Antimicrobial Suscep-
tibility Testing. Library of Congress Cataloging-in-
Publication Data. 2005.
[19] Mary Jane Ferraro. Antimicrobial Susceptibility Test-
ing: A Review of General Principles and Contempo-
rary Practices. 2009;49(11):1749-1755.
[20] Schillinger V., Luke, K.K. Antibacterial activity of
Lactobacillus sake isolated from meat. Appl. Environ.
1989; 55:1091-1096.
88
7 trang
23240
Free
Bạn đang xem tài liệu "Hoạt tính kháng khuẩn của chiết xuất thảo dược lên vi khuẩn Vibrio parahaemolyticus gây bệnh hoại tử gan tụy cấp tính trên tôm thẻ chân trắng (Litopenaeus vannamie) trong điều kiện in vitro", để tải tài liệu gốc về máy hãy click vào nút Download ở trên
File đính kèm:
- hoat_tinh_khang_khuan_cua_chiet_xuat_thao_duoc_len_vi_khuan.pdf
