Đồ án Khả năng sử dụng một số vi khuẩn lab phân lập trong khoang miệng ức chế sự tạo thành màng sinh học của Lactobacillus fermentum
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO
TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ TP.HỒ CHÍ MINH
ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP
KHẢ NĂNG SỬ DỤNG MỘT SỐ VI KHUẨN LAB PHÂN
LẬP TRONG KHOANG MIỆNG ỨC CHẾ SỰ TẠO
THÀNH MÀNG SINH HỌC CỦA Lactobacillus fermentum
Ngành:
CÔNG NGHỆ SINH HỌC
CÔNG NGHỆ SINH HỌC
Chuyên ngành:
Giảng viên hướng dẫn: TS. Nguyễn Hoài Hương
Sinh viên thực hiện:
MSSV: 1311100138
Nguyễn Đặng Vân Anh
Lớp: 13DSH02
TP.Hồ Chí Minh, 2017
Đồ án tốt nghiệp
LỜI CAM ĐOAN
Đồ án tốt nghiệp này là công trình nghiên cứu của tôi dưới sự hướng dẫn của TS.
Nguyễn Hoài Hương Giảng viên Khoa Công Nghệ Sinh Học – Thực Phẩm – Môi
trường của trường Đại Học Công Nghệ Thành Phố Hồ Chí Minh.
Những kết quả này hoàn toàn không sao chép từ các nghiên cứu khoa học khác
dưới bất kì hình thức nào. Các số liệu trích dẫn trong đồ án này đều hoàn toàn trung
thực. Tôi xin chịu trách nhiệm toàn bộ về đồ án của mình.
Tp.HCM, ngày tháng năm 2017
Sinh viên thực hiện
Nguyễn Đặng Vân Anh
i
Đồ án tốt nghiệp
LỜI CÁM ƠN
Để hoàn thành được đồ án “Khả năng sử dụng một số vi khuẩn LAB phân
lập trong khoang miệng ức chế sự tạo thành màng sinh học của Lactobacillus
fermentum” trong suốt quá trình học tập, rèn luyện và trau dồi kiến thức em đã gặp
phải không ít lần khó khăn nhưng nhờ có sự quan tâm, giúp đỡ và hướng dẫn tận tình
của TS. Nguyễn Hoài Hương, Giảng viên Khoa Công nghệ Sinh học - Thực phẩm -
Môi trường trường Đại học Công nghệ TPHCM, cùng những kiến thức và kỹ năng cần
thiết Cô truyền dạy mà em có thể đạt được thành quả của ngày hôm nay. Em xin chân
thành cảm ơn cô.
Bên cạnh đó, em cũng xin gửi lời cám ơn sâu sắc đến các Thầy Cô giảng viên và
Ban lãnh đạo Khoa Công nghệ Sinh học – Thực phẩm – Môi trường trường Đại học
Công nghệ TPHCM đã tạo điều kiện giúp em tiếp cận được nhiều nguồn tài liệu để
hoàn thành đồ án tốt nghiệp đúng thời gian quy định.
Dù đồ án đã hoàn thành nhưng không tránh khỏi những sai sót nhất định do khả
năng hiểu biết hạn hẹp và thông tin tài liệu không mấy khả quan để phục vụ quá trình
thực hiện đồ án. Kính mong nhận được sự góp ý và chỉ dạy của các Thầy Cô để em học
hỏi thêm những kinh nghiệm, tích lũy cho quá trình học tập rèn luyện và chuẩn bị hành
trang bước sang một môi trường làm việc mới sau này.
Ngoài ra, con xin trân trọng gửi lời cảm ơn đến ba mẹ, gia đình, những người đã
bên con và tạo mọi điều kiện tốt nhất cho con trong quá trình thực hiện đồ án tốt
nghiệp.
Em xin chân thành cảm ơn!
TP.HCM, ngày tháng năm 2017
Sinh viên thực hiện
Nguyễn Đặng Vân Anh
ii
Đồ án tốt nghiệp
MỤC LỤC
LỜI CAM ĐOAN .............................................................................................................i
LỜI CÁM ƠN ..................................................................................................................ii
MỤC LỤC...................................................................................................................... iii
DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT...........................................................................................ii
DANH MỤC BẢNG...................................................................................................... iii
DANH MỤC HÌNH ẢNH ..............................................................................................iv
MỞ ĐẦU..........................................................................................................................1
1. Tính cấp thiết của đề tài .......................................................................................1
2. Tình hình nghiên cứu ...........................................................................................2
3. Mục tiêu nghiên cứu.............................................................................................3
4. Nhiệm vụ nghiên cứu...........................................................................................4
5. Phương pháp nghiên cứu......................................................................................4
6. Các kết quả đạt được............................................................................................5
7. Kết cấu đồ án........................................................................................................5
CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN............................................................................................6
1.1. Tổng quan về vi khuẩn Lactic (LAB) ..............................................................6
1.2. Tổng quan về Probiotic..................................................................................19
1.3. Màng sinh học................................................................................................31
1.4. Sâu răng..........................................................................................................37
2.1. Địa điểm nghiên cứu ......................................................................................44
2.2. Thời gian thực hiện ........................................................................................44
2.3. Vật liệu và thiết bị..........................................................................................44
2.4. Phương pháp luận...........................................................................................45
2.5. Phương pháp thí nghiệm ................................................................................47
iii
Đồ án tốt nghiệp
3.1. Kết quả thử nghiệm sinh lý............................................................................64
3.2. Kết quả thử nghiệm sinh hóa .........................................................................67
3.3. Kết quả khả năng sinh enzyme ......................................................................71
3.4. Kết quả khả năng kháng khuẩn......................................................................75
3.5. Kết quả khả năng kháng kháng sinh ..............................................................77
khi qua xử lý nhiệt...................................................................................................81
1. Kết luận ..............................................................................................................84
2. Kiến nghị............................................................................................................84
TÀI LIỆU THAM KHẢO..............................................................................................85
PHỤ LỤC XỬ LÝ SỐ LIỆU .........................................................................................94
iv
Đồ án tốt nghiệp
PHỤ LỤC THÀNH PHẦN MÔI TRƯỜNG
Thành phần môi trường de Man, Rogosa, Sharpe agar (MRS agar):
Tween 80
Cao thịt
1ml
10g
5g
MgSO4.7H2O
MgSO4.4H2O
K2PO4
0.2g
0.2g
2g
Pepton
Yest Extract
D-glucose
5g
Nước cất
Agar
1000ml
2%
10g
Diamonium Citrate 2g
Điều chỉnh pH = 6.5 ± 0.2 tại 25oC.
Thành phần môi trường de Man, Rogosa, Sharpe broth (MRS broth):
Tween 80
Cao thịt
1ml
10g
5g
Diamonium Citrate 2g
MgSO4.7H2O
MgSO4.4H2O
K2PO4
0.2g
0.2g
2g
Pepton
Yest Extract
D-glucose
5g
10g
Nước cất
1000ml
Điều chỉnh pH = 6.5 ± 0.2 tại 25oC.
Thành phần nước muối sinh lí:
NaCl
9g
Nước cất
1000ml
Thành phần môi trường Glucose Phosphate broth (MR – VP broth):
Peptone
Dextrose
K2HPO4
Nước cất
7g
5g
5g
1000ml
v
Đồ án tốt nghiệp
Thành phần môi trường Simmon citrate agar (SCA)
MgSO4.7H2O
NH4H2PO4
K2HPO4
0,2g
1g
1g
Na3C6H5O7
NaCl
2g
5g
Bromothymol blue 0,08g
Agar
15g
Nước cất
1000ml
Điều chỉnh pH = 6.8 ± 0.2 tại 25oC.
Thành phần môi trường canh tryptone:
Tryptone
NaCl
10g
5g
Nước cất
1000ml
Điều chỉnh pH = 7.5 ± 0.2 tại 25oC
Thành phần môi trường Triple sugar iron agar (TSI):
Cao thịt
Peptone
Yeast extract
Lactose
Sucrose
Dextrose
FeSO4
3g
NaCl
5g
20g
3g
Na2S2O3
Phenol red
Agar
0,3g
0,024g
15g
10g
10g
1g
Nước cất
1000ml
Điều chỉnh pH = 7.0 ± 0.2 tại
25oC.
0,2g
ii
Đồ án tốt nghiệp
Thành phần môi trường Blood agar:
Beef heart infusion 500g
Tryptose
NaCl
10g
5g
Agar
15g
Máu cừu
50ml
Nước cất
950ml
Điều chỉnh pH = 7.3 ± 0.2 tại 25oC.
Thành phần môi trường Skim milk agar:
Bột sữa gầy
28g
Casein enzymic hydrolysate
Cao nấm men
Dextrose
5g
2,5g
1g
Agar
15g
Điều chỉnh pH = 7.0 ± 0.2 tại 25oC.
Thành phần môi trường Lactobacillus biofilm medium (LBM):
Peptone
5g
CH3COONa.H2O 2,5g
Cao nấm men
K2HPO4
2,5g
3g
MgSO4
MnSO4
CaCl2
0,05g
0,025g
0,1g
(NH4)3C6H5O7
Dextrose
1g
10g
5g
Nước cất
1000ml
Cao thịt
Tween 80
0,5g
Điều chỉnh pH = 7.0 ± 0.2 tại 25oC.
ii
Đồ án tốt nghiệp
DANH MỤC BẢNG
răng miệng .......................................................................................................................3
Bảng 3.1. Kết quả thử nghiệm sinh lý ..........................................................................64
Bảng 3.2. Kết quả thử nghiệm sinh hóa ........................................................................67
Bảng 3.3. Kết quả thử nghiệm lên men carbohydrate ..................................................69
Bảng 3.5. Tỉ lệ kháng khuẩn của các chủng lactic (%) ................................................76
Bảng 3.6. Kết quả kháng kháng sinh của các chủng lactic ...........................................77
nhiệt ...............................................................................................................................82
iii
Đồ án tốt nghiệp
DANH MỤC HÌNH ẢNH
Hình 1.1. Môt sô vi khuân lactic điên hinh ....................................................................8
miệng .............................................................................................................................28
Hình 1.4. Các dạng sản phẩm từ sữa có chứa probiotic ...............................................29
Hình 1.5. Các giai đoạn hình thành màng sinh học ......................................................32
đáy một chai thủy tinh được chụp dưới kính hiển vi điện tử ........................................32
sinh học .........................................................................................................................35
nước nóng Mickey, Oregon ..........................................................................................36
Hình 2.1. Sơ đồ nghiên cứu ..........................................................................................46
lactic bị xử lý nhiệt ........................................................................................................63
Hình 3.4. Kết quả thử nghiệm H2S ...............................................................................68
Hình 3.5. Kết quả thử nghiệm Indole (+:Escherichia coli) ..........................................69
iv
Đồ án tốt nghiệp
thử nghiệm β- galactosidase...........................................................................................74
Hình 3.12. Kết quả kháng kháng sinh của các chủng lactic .........................................80
lactic sau khi xử lý nhiệt ...............................................................................................81
v
Đồ án tốt nghiệp
MỞ ĐẦU
1. Tính cấp thiết của đề tài
Song song với sự phát triển về kinh tế, chính trị và xã hội thì các nghiên cứu khoa
học thuộc lĩnh vực Công nghệ sinh học cũng ngày càng phát triển. Ngày nay con người
đã ứng dụng các thành tựu khoa học công nghệ vào trong cuộc sống, từ công nghiệp,
nông nghiệp, an ninh quốc phòng cho đến giải trí, v.v...
Các nhà khoa học cùng với các nhà nghiên cứu đã ứng dụng các kiến thức từ
các tài liệu trên toàn thế giới và áp dụng các biện pháp kỹ thuật mới để cho ra đời các
giống cây trồng, vật nuôi, vi sinh vật có tính năng ưu việt hơn các giống hiện có. Bên
cạnh đó người ta còn tạo ra những loại thức ăn mới, nghiên cứu ra các loại thuốc, các
bộ kit xác định bệnh, những nhân tố mới có giá trị phục vụ đời sống, phát triển kinh tế
- xã hội và bảo vệ môi trường.
Ngoài ra, đã có nhiều kết quả nghiên cứu khoa học áp dụng cho lĩnh vực công
nghệ thực phẩm. Từ những nghiên cứu đó chúng ta cho ra đời các loại vi sinh vật dùng
trong chế biến nhằm làm tăng giá trị dinh dưỡng, cảm quan và bảo quản thực phẩm,
làm cho thực phẩm không đơn giản chỉ là bổ sung năng lượng mà còn có thể giúp con
người phòng chống một số bệnh, tăng cường hệ miễn dịch của cơ thể.
Đi đôi với sự phát triển không ngừng của xã hội, nhu cầu sử dụng các chế phẩm,
thực phẩm cũng như việc sinh hoạt lành mạnh để có được sức khỏe tốt luôn là mục tiêu
của rất nhiều người đang hướng tới. Thời gian gần đây, chúng ta thường nghe nhiều về
khái niệm “Probiotics” mà không phải ai cũng hiểu Probiotics là gì. Probiotics trên
thực tế chính là các vi khuẩn sống có lợi đường ruột, khi ăn vào đem lại các lợi ích sức
khoẻ con người nhờ cải thiện hệ vi sinh đường ruột và chức năng của ruột. Hai loài vi
khuẩn probiotics thông dụng hiện này Bifidobacteria và Lactobacillus. Vi khuẩn
probiotic giúp tăng cường hệ miễn dịch, ngăn ngừa ung thư... Ngoài ra, việc có thể phát
hiện được một loài vi khuẩn có khả năng ức chế sự tạo thành màng sinh học của các vi
khuẩn có hại trong khoang miệng để hạn chế khả năng gây sâu răng đồng thời mang
1
Đồ án tốt nghiệp
tính an toàn như một chủng vi khuẩn Probiotic cũng được khá nhiều nhà khoa học quan
tâm và đó là lý em em chọn thực hiện đề tài này. Em muốn mình có thể tìm hiểu cụ thể
hơn về loại vi khuẩn này cũng như hy vọng rằng có thể vận dụng những điều mình biết
được vào thực tế, cụ thể là khi làm việc sau này.
2. Tình hình nghiên cứu
Trong nhiều năm qua, đã có nhiều nghiên cứu in vivo và in vitro nhằm tìm ra tác
động của vi khuẩn lactic trong khoang miệng. Các nhà khoa học cũng mong muốn khi
vi khuẩn lactic được sử dụng dưới dạng probiotic sẽ có khả năng tồn tại một thời gian
nhất định trong nước bọt. Năm 2006, Haukioja và cộng sự đã tìm được một số chủng
probiotic có khả năng này [43], khiến cho việc sử dụng vi khuẩn lactic nói chung và
probiotic nói riêng để bảo vệ răng miệng trở nên khả quan hơn.
Bussher và cộng sự đã xác định được rằng L. acidophilus và L. casei có trong sữa
chua đã làm giảm tỷ lệ của các Lactobacillus spp. khác và Streptococcus mutans trong
nước bọt và mảng bám răng của các đối tượng nghiên cứu xuống sau một tuần sử dụng
[48]. Ahola và cộng sự cũng khảo sát tương tự nhưng trong sản phẩm lên men pho mát,
LGG và Lactobacillus rhamnosus LC 705 có trong pho mát có thể làm giảm tỷ lệ sâu
răng ở trẻ nhỏ [49].
Hallstrom và cộng sự cũng đã chứng minh được việc sử dụng chủng probiotic
L. reuteri ATCC 55730 và ATCC PTA 5289 không góp phần hình thành mảng bám
trong khoang miệng [44].
Hầu hết các nghiên cứu lâm sàng của probiotic trong việc bảo vệ răng miệng đều
thông qua việc định lượng tổng vi khuẩn mutans streptococci (MS) trong khoang
miệng. Các thành quả nghiên cứu trong những năm gần đây được tổng hợp ở bảng 1.
2
Đồ án tốt nghiệp
Bảng 0. Tổng hợp các nghiên cứu khảo sát một số chủng probiotic trong việc bảo vệ
răng miệng [50].
Độ tuổi –
số đối
tượng
nghiên
cứu
Thời
gian
nghiên
cứu
Tổng MS
trong
khoang
miệng
Tình
trạng
sâu
Tác giả
Chủng probiotic
răng
Nase và cs, 2001
L. rhamnosus GG
Lactobacillus spp.
L. reuteri ATCC 55730
Lactobacillus spp.
Bifidobacterium animalis ssp.
lactis DN-173010
7 m
3 w
2 w
45 d
1–6, 594
18–35, 74
20, 40
-
-
Ahola và cs, 2002
Nikawa và cs, 2004
Montalto và cs, 2004
Caglar và cs, 2005
23–37, 35
-
2 w
21–24, 21
-
Caglar và cs, 2006
Caglar và cs, 2007
Caglar và cs, 2008
Caglar và cs, 2009
L. reuteri ATCC 55730
L. reuteri ATCC 55730
Bifidobacterium lactis BB-12
L. reuteri ATCC 55730, L. reuteri
ATCC PTA 5289
2 w
3 w
10 d
21–25, 120
21–24, 80
20–24, 40
-
-
-
10 d
2 w
20, 20
-
-
Cildir và cs, 2009
Bifidobacterium animalis ssp.
lactis DN-173010
12–16, 24
Stecksen-Blicks và cs,
2009
Lexner và cs, 2010
Singh và cs, 2011
L. rhamnosus LB21
21 m
2 w
1–5, 174
12–15, 20
12–14, 40
-
L. rhamnosus LB21
L. acidophilus La5
10 d
-
Bifidobacterium lactis Bb-12
L. rhamnosus, Bifidobacterium
longum, Saccharomyces cerevisae
L. rhamnosus GG, L. reuteri
SD2112, L. reuteri PTA 5289
L. paracasei GMNL- 33
L. reuteri ATCC PTA 5289, L.
reuteri DSM 17938
Jindal và cs, 2011
14 d
7–14, 150
-
Marttinen và cs, 2012
2 w
2 w
20–30, 13
20–26, 70
4–12, 19
-
-
Chuang và cs, 2011
Cildir và cs, 2012
25 d
15 m
-
Petersson và cs, 2011
Taipale và cs, 2012
L. rhamnosus LB21
Bifidobacterium animalis BB-12
58–84, 160
2 tháng
15 m
tuổi đến 2
tuổi, 106
12-15, 40
10-12, 40
Juneja và Kakade, 2012
Sudhir và cs, 2012
L. rhamnosus hct 70
L. acidophilus
9 w
3 w
-
-
(d, ngày; w, tuần; m, tháng;, giảm; , không thay đổi; -, âm tính)
3. Mục tiêu nghiên cứu
Sử dụng các chủng vi khuẩn lactic đã được phân lập từ khoang miệng. Mục tiêu
cuối cùng sau khi thực hiện các thử nghiệm khảo sát là xác định xem chúng có khả
3
Đồ án tốt nghiệp
năng ức chế sự tạo thành màng sinh học của Lactobacillus fermentum không và có đủ
an toàn để bổ sung vào các sản phẩm sử dụng cho con người và động vật không.
4. Nhiệm vụ nghiên cứu
_ Tiến hành các thử nghiệm sinh lý, sinh hóa.
_ Khảo sát khả năng kháng khuẩn.
_ Khảo sát khả năng kháng kháng sinh.
_ Xác định độ an toàn và khả năng ức chế màng sinh học của Lactobacillus fermentum.
5. Phương pháp nghiên cứu
a) Phương pháp luận
_ Tiến hành các thử nghiệm sinh lý: khả năng chịu nhiệt ở 10oC, 45oC, 60oC; khả năng
chịu mặn: 3,5% NaCl và 6,5% NaCl; khả năng sinh bào tử; khả năng sinh dưỡng trong
điều kiện kỵ khí.
_ Tiến hành các thử nghiệm sinh hóa: khả năng lên men carbohydrate; thử nghiệm MR
– VP; thử nghiệm Citrate; Thử nghiệm Indole; khả năng sinh H2S.
_ Khảo sát khả năng sinh enzyme: enzyme thủy phân Gelatin; enzyme thủy phân
Casein; thử nghiệm tan huyết; thử nghiệm 훽 – Galactosesidase.
_ Khảo sát khả năng kháng khuẩn bằng phương pháp đo độ đục.
_ Khả năng kháng kháng sinh bằng phương pháp khuếch tán đĩa thạch (Agar Diffusion
Test).
_ Khả năng ức chế tạo màng sinh học của Lactobacillus fermentum sử dụng các vi
khuẩn lactic sau xử lý nhiệt.
b) Phương pháp xử lý số liệu
- Sử dụng phần mềm excel để vẽ đồ thị.
- Sử dụng phần mềm SAS 9.4 để xử lý số liệu.
4
Đồ án tốt nghiệp
6. Các kết quả đạt được
_ Chọn được chủng vi khuẩn lactic an toàn và có thể ứng dụng để ức chế sự hình thành
màng sinh học của Lactocbacillus fermentum.
7. Kết cấu đồ án
Mở đầu
Chương 1: Tổng quan tài liệu – nội dung chương đề cập đến các nội dung liên
quan đến tài liệu nghiên cứu
Chương 2: Vật liệu và phương pháp nghiên cứu – nội dung chương đề cập đến
các dụng cụ, thiết bị và các phương pháp nghiên cứu trong đồ án.
Chương 3: Kết quả và biện luận – nội dung chương đưa ra những kết quả mà đề
tài thực hiện được và đưa ra những biện luận cho kết quả thu được.
Chương 4: Kết luận và kiến nghị – nội dung chương tóm lại những kết quả mà đề
tài đạt được và đề nghị cho những hướng cải thiện thêm trong đề tài.
5
Đồ án tốt nghiệp
CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN
1.1. Tổng quan về vi khuẩn Lactic (LAB)
1.1.1. Giới thiệu chung
Vi khuẩn lactic (LAB) có vai trò rất quan trọng trong cuộc sống của chúng ta.
Chúng tạo ra các thực phẩm lên men và bảo quản thực phẩm khỏi bị hư hỏng. Từ đầu
thế kỷ 20, Elie Metchnikoff (1845-1916) đã đề xuất sử dụng các LAB cho mục đích
chữa bệnh. Từ đó, lĩnh vực nghiên cứu probiotic đã ra đời và phát triển. Đến nay,
những nghiên cứu về probiotic đã không ngừng cung cấp những bằng chứng có tính
khoa học về hiệu quả thực sự của probiotic đối với sức khỏe con người.
Từ lâu vi khuẩn lactic đã được con người ứng dụng rộng rãi để chế biến các loại
thực phẩm lên men (sữa chua, muối dưa, muối cà,...), ủ chua thức ăn cho gia súc hoặc
để sản xuất acid lactic và các loại muối của acid lactic. Từ năm 1780, lần đầu tiên nhà
hóa học người Thụy Điển Scheele đã tách được acid lactic từ sữa bò lên men chua.
Năm 1875, L. Pasteur đã chứng minh được rằng việc làm sữa chua là kết quả hoạt động
của một nhóm vi sinh vật đặc biệt gọi là vi khuẩn lactic. 21 năm sau đó (1878), Lister
đã phân lập được vi khuẩn lactic và đặt tên là Bacterium lactic (ngày nay gọi là
Streptococcus lactic) và đến năm 1881 ngành công nghiệp lên men nhờ vi khuẩn lactic
đã được hình thành.
Vi khuẩn lên men lactic gọi là vi khuẩn lactic, hiện nay chúng được công nhận là
an toàn sinh học (generally recognized as safe - GRAS), được sử dụng thường xuyên
trong thực phẩm và có đóng góp trong hệ vi sinh vật có ích của con người.
Một đặc tính quan trọng khác của vi khuẩn lactic là chúng có khả năng tạo ra
bacteriocin (chất kháng khuẩn) như lactacin, brevicin, lacticin, helveticin, sakacin,
plantacin,... có tác dụng ức chế một số vi sinh vật gây bệnh, ngăn chặn sự phát triển
của các nguồn bệnh trong thực phẩm [2] [3].
6
Đồ án tốt nghiệp
Vi khuẩn lactic có hoạt tính kháng khuẩn diện rộng do có khả năng sản xuất ra
các chất ức chế: như một số acid hữu cơ, hydrogen peroxide, diacetyl, các chất có khối
lượng phân tử thấp và bacteriocin là chất có khả năng ức chế cả vi khuẩn gram (+) và
vi khuẩn gram (-). Các chủng vi khuẩn lactic có khả năng sản sinh acid hữu cơ, đặc
biệt là acid lactic trong quá trình sinh trưởng và phát triển. Đối với hydroxy peroxide
thì khả năng kháng khuẩn là do việc tạo ra các chất oxy hóa mạnh như oxygen nguyên
tử, các gốc tự do superoxide và các gốc tự do hydroxyl. Đối với bacteriocin, cơ chế
kháng khuẩn do vi khuẩn lactic tổng hợp đã được nghiên cứu đầu tiên ở nisin,
bacteriocin gram (+) [4].
̣
1.1.2. Đăc điêm hinh thai cua vi khuân lactic.
̉ ̉
́ ̉
̀
Các tế bào có hình dáng đa dạng: từ hình que dài, mảnh đến hình que ngắn uốn
cong, thường tạo thành chuỗi. Không có khả năng di động (ngoại trừ một số chủng có
tiên mao hoặc lông roi trên bề mặt cơ thể), không sinh bào tử, gram dương. Một số
chủng thể hiện tính lưỡng cực, xuất hiện các chấm nhỏ hoặc các đường kẻ dọc (quan
sát qua kính hiển vi) khi nhuộm vi khuẩn với thuốc nhuộm gram hoặc methylene blue.
[51]
̀ ̣
Khuẩn lạc của vi khuẩn lactic tròn nhỏ, trong bê măt bóng, màu trắng đục hoặc
màu vàng kem, hoặc khuẩn lạc có kính thước to hơn tròn lồi trắng đục. Đặc biệt khuẩn
lạc tỏa ra mùi chua của acid.
Về kích thước tế bào thì đối với các dạng cầu khuẩn là từ 0.5 – 1.5μm. Các tế
bào hình cầu xếp thành cặp hoặc hình chuỗi có chiều dài khác nhau. Còn với trực
khuẩn thì từ 1 - 8μm. Trực khuẩn đứng riêng lẻ hoặc kết thành chuỗi.
̉
̉
Đặc điểm hình thái giống vi khuân lactic điên hinh:
̀
̉
́ ́ ̣ ̣ ̣
Trong sô cac vi khuân lactic, giông Lactobacillus đươc xem la đai diên cho chung
̉
́ ̀
̉
vi khuân nay.
̀
7
Đồ án tốt nghiệp
Tùy thuộc vào hình thái tế bào mà người ta chia vi khuẩn lactic thành 2 dạng :
hình cầu và hình que. Kích thước của chúng thay đổi tùy theo từng loài.
_Giống Lactobacillus
Giới : Vi khuẩn
Ngành : Firmicutes
Lớp: Bacilli
Bộ: Lactobacillales
Họ: Lactobacillacea
Giống: Lactobacillus
a)
c)
d)
b)
̉ ̉
̣ ́
sô vi khuân lactic điên hinh
̀
Hình 1.1. Môt
a) Lactobacillus casei
b) Latobacillus brevis
c) Lactobacillus bulgaricus
d) Lactobacillus plantarum
8
Tải về để xem bản đầy đủ
129 trang
18520
Free
Bạn đang xem 20 trang mẫu của tài liệu "Đồ án Khả năng sử dụng một số vi khuẩn lab phân lập trong khoang miệng ức chế sự tạo thành màng sinh học của Lactobacillus fermentum", để tải tài liệu gốc về máy hãy click vào nút Download ở trên
File đính kèm:
- do_an_kha_nang_su_dung_mot_so_vi_khuan_lab_phan_lap_trong_kh.pdf
